一种预防治疗HPV和宫颈癌的药物组合物及其制备方法与流程

本发明属于生物医药，具体涉及一种预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物及其制备方法。

背景技术：

1、hpv（人乳头瘤病毒）是一种广泛存在的病毒，能够引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖，导致宫颈癌。根据病毒的致病风险，hpv被分为高危型和低危型两大类。高危型hpv，尤其是hpv16和hpv18，与宫颈癌等恶性肿瘤的发生密切相关，它们在宫颈癌的发生中起着至关重要的作用，通过其特定的基因产物（如e6和e7蛋白）与宿主细胞的dna整合，干扰细胞的正常生长和分化过程，抑制抑癌基因的功能，促进细胞的异常增殖和癌变。

2、目前，针对宫颈癌的治疗手段已涵盖手术治疗、放疗、化疗以及免疫治疗等方法，其中免疫治疗因其独特的机制在近年来备受关注。随着免疫学的不断发展，免疫细胞疗法已成为肿瘤治疗领域的重要研究方向。通过激活或增强患者自身的免疫系统，特别是t细胞和自然杀伤细胞（nk细胞）等免疫细胞，可以特异性地识别和清除被hpv感染的细胞及早期癌变细胞，为hpv感染和宫颈癌的治疗提供了新的策略。

3、尽管当前防治hpv和宫颈癌的技术已经取得了显著的进展，但仍存在一些不足之处。这些不足主要体现在以下几个方面：如药物疗效不佳、副作用大、制备工艺复杂等。

4、梣酮作为白鲜皮中的活性成分之一，具有潜在的抗肿瘤作用。杜拉鲁肽，作为一种已用于其他疾病治疗的生物制剂，不仅能够有效调节免疫应答机制并抑制炎症反应，还具有潜在的抗肿瘤及抗病毒作用。但还未见有报道将梣酮与杜拉鲁肽用于防治hpv和宫颈癌，基于以上背景，本发明开发一种新型、高效、安全的药物组合物，用于预防和治疗hpv感染及宫颈癌。

技术实现思路

1、本发明的第一目的在于提供一种预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物。

2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

3、一种预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，按重量份数计，包括1-1.5份免疫细胞裂解蛋白、0.5-1份梣酮复合物、0.3-0.7份杜拉鲁肽。

4、进一步地，所述免疫细胞裂解蛋白的具体制备过程如下：

5、（1）分离获取免疫细胞；

6、（2）将步骤（1）免疫细胞的培养上清液离心三次，将第三次离心后的细胞沉淀重悬，得到免疫细胞胞外基质蛋白；

7、（3）将步骤（1）得到的免疫细胞经过反复冻融，得到细胞裂解蛋白；将细胞裂解蛋白和步骤（2）得到的免疫细胞胞外基质蛋白等量混匀加入盐水中，即得。

8、进一步地，所述免疫细胞为从人外周血分离培养得到的cik细胞。

9、进一步地，所述cik细胞的获取方法如下：

10、s1. 将人外周血用pbs缓冲液稀释，然后加至淋巴细胞分离液的上方，离心后吸取中间的白膜层，洗涤，收集外周血单个核细胞；

11、s2. 用培养基调整外周血单个核细胞的浓度，加入ifn-γ培养24h，然后加入cd3单克隆抗体和重组人il-2，每隔2天加入含有cd3单克隆抗体和重组人il-2的培养基，培养13-15天，得到cik细胞。

12、进一步地，步骤s2中所述单个核细胞在培养基中的浓度为1-5×106个/ml，ifn-γ在培养基中的浓度为800-1000u/ml，cd3单克隆抗体在培养基中的浓度为40-60ng/ml，重组人il-2在培养基中的浓度为500-800u/ml。

13、进一步地，所述梣酮复合物的制备过程包括如下步骤：

14、将梣酮加入羟乙基-β-环糊精水溶液中，超声均匀后振荡，得到混合溶液；将混合溶液静置、离心，取上清液进行冷冻干燥，即得。

15、进一步地，所述梣酮和羟乙基-β-环糊精的质量比为1：35-40，羟乙基β-环糊精水溶液的浓度为0.15-0.2g/ml。

16、进一步地，所述超声的功率为200-300w，所述振荡的时间为24-48h。

17、进一步地，所述宫颈癌为hpv16和/或hpv18感染引起的宫颈癌。

18、本发明的第二目的在于提供一种预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物的制备方法。

19、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

20、上述预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物的制备方法，包括如下步骤：

21、按照上述重量份将免疫细胞裂解蛋白、梣酮复合物、杜拉鲁肽混合均匀，即得。

22、本发明的有益技术效果在于：

23、（1）协同作用：本发明组合物中的免疫细胞裂解蛋白、梣酮复合物、杜拉鲁肽能够协同作用，有效抑制宫颈癌细胞的增殖，预防治疗宫颈癌。

24、（2）降低单药的毒副作用：免疫细胞裂解蛋白与梣酮复合物、杜拉鲁肽联用，能够降低单药的毒副作用。

25、（3）应用前景：本发明所述组合物在预防治疗hpv和宫颈癌方面具有广泛的应用前景。

1.一种预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，按重量份数计，包括1-1.5份免疫细胞裂解蛋白、0.5-1份梣酮复合物、0.3-0.7份杜拉鲁肽。

2.根据权利要求1所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述免疫细胞裂解蛋白的制备过程如下：

3.根据权利要求2所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述免疫细胞为从人外周血分离培养得到的cik细胞。

4.根据权利要求3所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述cik细胞的获取方法如下：

5.根据权利要求4所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，步骤s2中所述单个核细胞在培养基中的浓度为1-5×106个/ml，ifn-γ在培养基中的浓度为800-1000u/ml，cd3单克隆抗体在培养基中的浓度为40-60ng/ml，重组人il-2在培养基中的浓度为500-800u/ml。

6.根据权利要求1所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述梣酮复合物的制备过程包括如下步骤：

7.根据权利要求6所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述梣酮和羟乙基-β-环糊精的质量比为1：35-40，羟乙基β-环糊精水溶液的浓度为0.15-0.2g/ml。

8.根据权利要求6所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述超声的功率为200-300w，所述振荡的时间为24-48h。

9.根据权利要求1所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物，其特征在于，所述宫颈癌为hpv16和/或hpv18感染引起的宫颈癌。

10.根据权利要求1~9任一项所述的预防治疗hpv和宫颈癌的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：