达托霉素纳米制剂及其制备方法和应用

1.达托霉素纳米制剂的制备方法，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂的制备方法包括：

2.根据权利要求1所述的达托霉素纳米制剂的制备方法，其特征在于，a步骤所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物、达托霉素的质量比为7.5～15：1。

3.根据权利要求1或2所述的达托霉素纳米制剂的制备方法，其特征在于，a步骤所述纳米粒子nps的制备方法包括：将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于氯仿中得到溶液a，达托霉素溶于甲醇中得到溶液b，将溶液a和溶液b混匀作为油相，并向其中加入pva水溶液作为外水相，20%～30%功率超声乳化成外观均匀的乳液，随后，立即减压旋蒸，挥去有机溶剂，得载药乳液，然后离心收集沉淀纳米粒即得；所述外水相和油相的体积比例为3～6:1，所述pva水溶液中pva与水的质量体积比为0.25g～1g:100ml。

4.根据权利要求1或2所述的达托霉素纳米制剂的制备方法，其特征在于，所述过表达rank的细胞膜囊泡的制备方法包括：用rank重组质粒转染293t细胞，建立rank过表达的293t细胞系，再提取过表达rank的细胞膜囊泡；所述rank重组质粒为插入rank基因片段的重组质粒。

5.根据权利要求4所述的达托霉素纳米制剂的制备方法，其特征在于，所述建立rank过表达的293t细胞系的方法包括：将重组质粒、包装质粒pspax2和pmd2.g以2:2:1的质量比例，通过pei转染试剂转染293t细胞，转染48～72h后，收集含慢病毒的培养上清液，用0.45μm滤器过滤后，将含慢病毒的上清液加入到新的293t细胞中感染48h后换液，并加入1μg/ml嘌呤霉素进行筛选，最后得到稳定的rank过表达的293t细胞系。

6.达托霉素纳米制剂，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂从里到外依次为达托霉素-聚乳酸-羟基乙酸共聚物-过表达rank的细胞膜囊泡，所述过表达rank的细胞膜囊泡的膜蛋白与聚乳酸-羟基乙酸共聚物重量比值为0.25。

7.根据权利要求6所述的达托霉素纳米制剂，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂采用如权利要求1～5任一项所述的达托霉素纳米制剂的制备方法制备得到。

8.根据权利要求6所述的达托霉素纳米制剂，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂的粒度范围为159.9±1.5nm，电位为-32.43±2mv。

9.根据权利要求6所述的达托霉素纳米制剂，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂为静脉给药制剂或关节腔注射制剂。

10.达托霉素纳米制剂在制备治疗类风湿关节炎药物中的应用，其特征在于，所述达托霉素纳米制剂为权利要求6～9任一项所述的达托霉素纳米制剂。