一种低强度脉冲超声治疗脊髓损伤后脱髓鞘的方法

本发明涉及生物医学，具体涉及一种低强度脉冲超声治疗脊髓损伤后脱髓鞘的方法。

背景技术：

1、创伤性脊髓损伤(sci)是一种常见的、破坏性的疾病。它往往导致患者出现运动和感觉功能的严重的永久性损害。这种功能障碍是由最初的机械损伤和随后持续数周或数月的继发性损伤引起的。继发性损伤是通过一连串的生化和病理变化发生的，这些变化加剧了组织损伤，包括炎症细胞浸润、氧化应激、缺血、炎症细胞因子释放和凋亡信号级联的启动。因此，针对脊髓损伤的治疗方法应着重于早期阶段的治疗，以防止继发性病理生理过程所引起的损害。已经评估了几种治疗方法，主要包括手术干预，药物治疗，干细胞治疗，生物材料，和功能性电刺激等。然而，研究这些治疗策略的疗效仍然有限，而且由于潜在的副作用和安全问题，它们的应用受到很大争议。因此，我们迫切需要开发一种针对脊髓损伤的有效、简单和稳定的治疗方法。

2、作为一种潜在的非侵入性神经调节技术，低强度脉冲超声(lipus)对中枢神经系统疾病的治疗效果一直是近年来研究的重点。自20世纪80年代以来，低强度脉冲超声的治疗应用研究有了很大进展。研究者们发现，沉积在组织中的超声能量可以通过辐射和机械应力诱发生物效应。并且这项物理干预技术(单独或与纳米微泡相结合)被广泛用于各种医学用途，如恶性癌症治疗，药物输送及康复性治疗。此外，最近的一些临床试验和实验研究报道，低强度脉冲超声可以引起抗炎反应，促进组织修复，并减少疼痛。在许多炎症性疾病(包括周围神经损伤)中，低强度脉冲超声的刺激可以减少炎症介质，如环氧化酶(cox)-1/2、诱导性一氧化氮合成酶(inos)、肿瘤坏死因子(tnf)-α和白细胞介素(il)-1β，以及免疫细胞浸润。特别是已有研究证明，每天针对脾脏的低强度脉冲超声刺激可以通过t和b淋巴细胞的免疫调节诱发抗炎反应，对炎症性关节炎有保护和治疗作用。该研究显示了超声对炎症性疾病的潜在治疗效果。此外，已有临床前研究报告称，经颅超声刺激通过诱导脑源性神经营养因子(bdnf)，对创伤性脑损伤患者产生了功能恢复和神经保护作用。上述所有结果提示了我们，低强度脉冲超声刺激可以阻止炎症反应和神经元损伤，同时促进神经元再生的可能性。

3、在过去的数十年中，超声在周围神经损伤与脑损伤的修复中已经得到了广泛的研究，超声神经调节的机制和系统的研究速度在加快并且已经部分实现临床转化。但是，令人遗憾的是在脊髓损伤领域尚无长足进展。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提出一种低强度脉冲超声治疗脊髓损伤后脱髓鞘的方法。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种脊髓横断小鼠模型的构建方法，所述构建方法包括以下：

4、s1、将小鼠置于笼中饲养，待小鼠适应环境，脱离应激状态后进行手术；

5、s2、使用异戊巴比妥麻醉小鼠，然后通过后背正中纵行约2-3cm的切口暴露脊髓，脊髓暴露后使用手术刀在t10水平进行横切，离断横切水平上下的脊髓，使其丧失解剖与生理的连续性；并且用4-0尼龙缝合肌层与皮肤层即可得到脊髓横断小鼠模型。

6、进一步地，所述小鼠为成年雄性c57bl/6小鼠。

7、进一步地，所述笼中的环境为自然光照与黑暗循环。

8、进一步地，所述异戊巴比妥的浓度为10％。

9、一种脊髓横断小鼠模型由上述所述的构建方法构建而成。

10、一种低强度脉冲超声治疗脊髓损伤后脱髓鞘的方法，所述治疗方法包括：

11、s1、使用异氟烷麻醉权利要求5所述的脊髓横断小鼠模型；

12、s2、使用超声投射凝胶均匀涂抹脊髓横断小鼠模型的手术处，再使用带有聚焦圆形探头的便携式超声处理设备对手术处进行超声照射；

13、s3、在损伤后4周，通过戊巴比妥钠腹腔注射处死小鼠，并截断损伤灶处上、下1cm的脊髓进行评估。

14、进一步地，所述用于麻醉的异氟烷的浓度为2％。

15、进一步地，所述聚焦圆形探头为有效辐射面积为0.9厘米的聚焦圆形探头。

16、进一步地，所述超声照射的强度为45mw/cm2的强度，照射频率为每隔3天照射一次；所述超声照射时的参数为：1mhz频率、1khz重复频率、20％占空比以及20min/d治疗持续时间。

17、一种低强度脉冲超声装置在制备治疗脊髓损伤后脱髓鞘设备中的应用。

18、本发明的有益效果：本发明所提出的脱髓鞘的方法，在动物实验中，从行为学层面来看，干预组鼠的运动和感觉功能均有所改善。此外可以代表髓鞘完整度及质量的数据，如mbp、mog蛋白表达量，髓鞘厚度、髓鞘g-ratio值等均显示脊髓损伤造模鼠在经过治疗后，脱髓鞘现象减轻缓解。

1.一种脊髓横断小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下：

2.根据权利要求1所述的一种脊髓横断小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述小鼠为成年雄性c57bl/6小鼠。

3.根据权利要求1所述的一种脊髓横断小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述笼中的环境为自然光照与黑暗循环。

4.根据权利要求1所述的一种脊髓横断小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述异戊巴比妥的浓度为10％。

5.一种脊髓横断小鼠模型由权利要求1～4任一所述的构建方法构建而成。

6.一种低强度脉冲超声治疗脊髓损伤后脱髓鞘的方法，其特征在于，所述治疗方法包括：

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述用于麻醉的异氟烷的浓度为2％。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述聚焦圆形探头为有效辐射面积为0.9厘米的聚焦圆形探头。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超声照射的强度为45mw/cm2的强度，照射频率为每隔3天照射一次；所述超声照射时的参数为：1mhz频率、1khz重复频率、20％占空比以及20min/d治疗持续时间。

10.一种低强度脉冲超声装置在制备治疗脊髓损伤后脱髓鞘设备中的应用。