猪甲型流感病毒疫苗的制作方法

1.一种免疫原性组合物，其包含编码第一神经氨酸酶(na)或其抗原性片段的第一α病毒rna复制子颗粒和编码第二na或其抗原性片段的第二α病毒rna复制子颗粒，条件是所述免疫原性组合物既不包含猪甲型流感病毒(iav-s)血凝素(ha)或其抗原性片段，也不包含编码所述iav-s血凝素(ha)或其抗原性片段的核苷酸序列；和其中所述第一na和所述第二na包含具有98％或更低同一性的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述第一na来源于来自第一系统发生簇的iav-s和所述第二na来源于来自第二系统发生簇的iav-s，其中所述第一系统发生簇和所述第二系统发生簇是不同的；和其中所述第一系统发生簇和所述第二系统发生簇分别选自下述：n1-经典簇、n1-大流行簇、n2-1998簇、和n2-2002簇。

3.根据权利要求2所述的免疫原性组合物，其中所述第一系统发生簇选自下述：所述n1-经典簇和所述n1-大流行簇，和其中所述第二系统发生簇选自下述：所述n2-1998簇和所述n2-2002簇。

4.根据权利要求3所述的免疫原性组合物，其中所述第一系统发生簇是所述n1-经典簇和所述第二系统发生簇是所述n2-2002簇。

5.根据权利要求2、3或4所述的免疫原性组合物，其还包含编码第三na或其抗原性片段的第三α病毒rna复制子颗粒；其中所述第三na来源于来自第三系统发生簇的iav-s；和其中所述第三系统发生簇与所述第一系统发生簇和所述第二系统发生簇是不同的。

6.根据权利要求5所述的免疫原性组合物，其还包含编码第四na或其抗原性片段的第四α病毒rna复制子颗粒；其中所述第四na来源于来自第四系统发生簇的iav-s；和其中所述第四系统发生簇与所述第一系统发生簇、所述第二系统发生簇、和所述第三系统发生簇是不同的。

7.根据权利要求6所述的免疫原性组合物，其中所述第一系统发生簇是n1-经典簇，所述第二系统发生簇是n2-2002簇，所述第三系统发生簇是n1-大流行簇，和所述第四系统发生簇是n2-1998簇。

8.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述第一na来源于来自第一谱系的iav-s和所述第二na来源于来自第二谱系的iav-s，其中所述第一谱系和所述第二谱系是不同的；和其中所述第一谱系和所述第二谱系分别选自下述：n1-大流行(eu)谱系、n1-欧亚禽类谱系、n2-根特/1984谱系、n2-意大利/4675/2003谱系、n2-苏格兰/1994(分支1)谱系、和n2-苏格兰/1994(分支2)谱系。

9.根据权利要求8所述的免疫原性组合物，其中所述第一谱系选自下述：n1-大流行(eu)谱系和n1-欧亚禽类谱系；和其中所述第二谱系选自下述：n2-根特/1984谱系、n2-意大利/4675/2003谱系、n2-苏格兰/1994(分支1)谱系、和n2-苏格兰/1994(分支2)谱系。

10.一种免疫原性组合物，其包含编码两种或更多种神经氨酸酶(na)或其抗原性片段的α病毒rna复制子颗粒；条件是所述免疫原性组合物既不包含猪甲型流感病毒(iav-s)血凝素(ha)或其抗原性片段，也不包含编码所述iav-s血凝素(ha)或其抗原性片段的核苷酸序列；和其中第一na和第二na包含具有98％或更低氨基酸同一性的氨基酸序列。

11.根据权利要求10所述的免疫原性组合物，其中所述第一na来源于来自第一系统发生簇的iav-s和第二na来源于来自第二系统发生簇的iav-s；其中所述第一系统发生簇和所述第二系统发生簇是不同的；和其中所述第一系统发生簇和所述第二系统发生簇分别选自下述：n1-经典簇、n1-大流行簇、n2-1998簇、和n2-2002簇。

12.根据权利要求11所述的免疫原性组合物，其中所述第一系统发生簇是n2-1998簇和所述第二系统发生簇是n2-2002簇。

13.根据权利要求11所述的免疫原性组合物，其中所述第一系统发生簇是n1-经典簇和所述第二系统发生簇是n1-大流行簇。

14.根据权利要求13所述的免疫原性组合物，其还包含编码第三na或其抗原性片段和第四na或其抗原性片段的第二αα病毒rna复制子颗粒；其中所述第三na来源于来自n2-1998簇的iav-s和所述第四na来源于来自n2-2002簇的iav-s。

15.根据权利要求10所述的免疫原性组合物，其中所述第一na来源于来自第一谱系的iav-s和第二na来源于来自第二谱系的iav-s；其中所述第一谱系和所述第二谱系是不同的；和其中所述第一谱系和所述第二谱系分别选自下述：n1-大流行(eu)谱系、n1-欧亚禽类谱系、n2-根特/1984谱系、n2-意大利/4675/2003谱系、n2-苏格兰/1994谱系(分支1)、和n2-苏格兰/1994谱系(分支2)。

16.根据权利要求15所述的免疫原性组合物，其中所述第一谱系是n1-大流行(eu)和所述第二谱系是n1-欧亚禽类。

17.根据权利要求16所述的免疫原性组合物，其还包含编码第三na或其抗原性片段和第四na或其抗原性片段的第二α病毒rna复制子颗粒；

18.根据权利要求15所述的免疫原性组合物，其中所述第一谱系是n2-根特/1984和所述第二谱系是n2-苏格兰/1994，分支2。

19.根据权利要求15所述的免疫原性组合物，其中所述第一谱系是n2-意大利/4675/2003和所述第二谱系是n2-苏格兰/1994，分支1。

20.根据权利要求1-19所述的免疫原性组合物，其还包含编码一种或多种另外的na或其抗原性片段的一种或多种另外的α病毒rna复制子颗粒；其中所述一种或多种另外的na来源于iav-s。

21.根据权利要求1-20所述的免疫原性组合物，其中每种α病毒rna复制子颗粒是委内瑞拉马脑炎病毒(veev)α病毒rna复制子颗粒。

22.一种有助于预防由流感病毒引起的疾病的疫苗，其包含权利要求1-21所述的免疫原性组合物，和药学上可接受的载体；条件是所述疫苗既不包含iav-s血凝素(ha)或其抗原性片段，也不包含编码iav-s血凝素(ha)或其抗原性片段的核苷酸序列。

23.根据权利要求22所述的疫苗组合物，其是无佐剂疫苗。

24.根据权利要求22所述的疫苗组合物，其包含选自下述的佐剂：可生物降解的油、具有2.5-50％(v/v)矿物油的水包油乳剂、和可生物降解的油与具有2.5-50％(v/v)矿物油的水包油乳剂的混合物。

25.根据权利要求24所述的疫苗组合物，其中所述可生物降解的油是dl-α-生育酚乙酸酯和所述矿物油是液体石蜡。

26.一种针对猪甲型流感病毒免疫猪的方法，其包括向所述猪施用免疫有效量的权利要求22、23、24和25所述的疫苗。