水母胶原蛋白的用途的制作方法

本发明涉及用于治疗伤口的水母胶原蛋白及其制造。

背景技术：

1、伤口愈合是一个复杂的过程，涉及不同免疫系统与生物系统之间的协调相互作用。长期伤口仍然是一个具有挑战性的临床问题，每年影响大约600万患者，具有很高的经济影响。

2、伤口愈合是皮肤(或另一器官组织)在受伤后自行修复的过程。在正常皮肤中，表皮(最外层)和真皮(内层或更深层)处于稳态平衡状态，并且与外界环境隔绝。当皮肤破裂时，伤口愈合的正常(生理)过程开始了。伤口愈合的经典模型包括三个或四个连续又重叠的阶段：

3、阶段1：止血。

4、阶段2：炎症。

5、阶段3：增生。

6、阶段4：重塑。

7、皮肤受伤后，一系列复杂的生化事件会以紧密协调的级联方式发生以修复损伤。由于许多潜在刺激(局部组织缺血、生物负载、坏死组织、反复创伤等)，伤口可能在炎性阶段停滞，从而导致伤口的慢性化。慢性伤口的一个关键组成部分是基质金属蛋白酶(mmp)水平升高。在升高的水平下，mmp不仅会降解不能存活的胶原蛋白，还会降解存活的胶原蛋白。另外，慢性伤口中的成纤维细胞可能无法分泌足够水平的mmp组织抑制剂(timp)来控制mmp的活性。这些事件阻止了细胞迁移所需支架的形成，并最终阻止了细胞外基质(ecm)和肉芽组织的形成。在包含糖尿病足溃疡在内的慢性伤口的情况下，相关的慢性微生物感染和炎症的组合可能导致毛细血管退化(血流减少)和截肢。因此，靶向糖尿病足溃疡(dfu)的新药物可以有利地提供刺激血液流向受影响区域并促进伤口愈合的能力。

8、基于胶原蛋白的伤口敷料已被证明特别适合通过充当伤口中的‘牺牲基质’来解决mmp水平升高的问题。还已经证明，胶原蛋白分解产品对于形成肉芽组织所需的多种细胞类型具有趋化性。另外，基于胶原蛋白的敷料具有吸收伤口渗出物和维持湿润伤口环境的能力。

9、许多不同的胶原蛋白敷料可供使用，所述胶原蛋白敷料采用各种载体/组合剂，如凝胶、糊剂、聚合物、氧化再生纤维素(orc)和乙二胺四乙酸(edta)。这些产品中的胶原蛋白往往源自牛、猪、马或禽类来源，其经过纯化以使其无抗原性。然而，有许多与这些胶原蛋白类型的使用相关的缺点，包含血管生成特性差、疾病和病毒传播风险增加以及与获得这些胶原蛋白相关的相当大的成本。

10、因此，将适合用于治疗伤口而不显示上述缺点的胶原蛋白来源将是特别有利的。

技术实现思路

1、本发明涉及用于治疗伤口的水母胶原蛋白。如将从下文呈现的体内和体外数据中显而易见的，本发明人惊奇地发现包括水母胶原蛋白的组合物可作为哺乳动物胶原蛋白(例如，牛)的替代物用于治疗伤口，同时显示等效的结果和提供许多优越的品质，如血管生成特性、增加的稳定性、低免疫原性以及较低的病毒传播和疾病/朊病毒传播风险。鉴于与哺乳动物胶原蛋白相比，水母胶原蛋白的物理化学和氨基酸特性大不相同，这是一个完全出乎意料的发现。

2、因此，本发明的第一方面涉及用于治疗伤口的组合物，其中所述组合物包括水母胶原蛋白。

3、本发明的第二方面涉及一种制造上述水母胶原蛋白的方法，其至少包括以下步骤：

4、i)从水母胶原蛋白来源中提取酸溶性胶原蛋白；以及

5、ii)纯化所述水母胶原蛋白以提供经纯化的水母胶原蛋白溶液。

1.组合物在制备用于治疗伤口的药物中的用途，其中所述组合物包括水母胶原蛋白，其中所述水母胶原蛋白呈微粉化粉末形式。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白是交联的。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白是非交联的。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白呈其去端肽形式。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白呈其端肽形式。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白是硫醇化的。

7.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白的来源来自钵水母纲(scyphozoa)亚门。

8.根据权利要求7所述的用途，其中所述水母胶原蛋白的来源选自由以下组成的组：褐色根口水母(rhizostomas pulmo)、海蜇(rhopilema esculentum)、地中海水母(rhopilemanomadica)、炮弹水母(stomolophus meleagris)、海月水母属(aurelia sp.)、仙后水母(cassiopea andromeda)、野村水母(nemopilema nomurai)或其任何组合。

9.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物进一步包括至少一种生长因子。

10.根据权利要求9所述的用途，其中所述至少一种生长因子是富血小板血浆(prp)、上皮生长因子38(egf)、转化生长因子-β(tgf-b、tgf-b2、tgf-b3)、肝细胞生长因子(hgf)、角质细胞生长因子(kgf)、粒细胞-单核细胞集落刺激生长因子、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子1(igf1)、碱性成纤维细胞生长因子(bfgf)和/或血管5内皮生长因子(vegf)或其任何组合。

11.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物进一步包括至少一种抗微生物化合物。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述至少一种抗微生物化合物是纳米银、青霉素(penicillin)、氧氟沙星(ofloxacin)、四环素(tetracycline)、氨基糖苷类、红霉素(erythromycin)、庆大霉素(gentamycin)、氟氯西林(flucloxacillin)、克拉霉素(clarithromycin)、强力霉素(doxycycline)、艮他霉素(gentamicin)、甲硝唑(metronidazole)、复合阿莫西林-克拉维酸(co-amoxiclav)、复方新诺明(co-trimoxazole)(在青霉素中)、头孢曲松(ceftriaxone)、哌拉西林(piperacillin)与他唑巴坦(tazobactam)、克林霉素(clindamycin)、环丙沙星(ciprofloxacin)、万古霉素(vancomycin)、替考拉宁(teicoplanin)、利奈唑胺(linezolid)和/或标准护理抗微生物剂或其任何组合。

13.根据权利要求1所述的用途，其中所述水母胶原蛋白被调配用于局部施涂于伤口。

14.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物进一步包括药学上可接受的赋形剂和/或载体和/或药学活性成分。

15.根据权利要求14所述的用途，其中所述药学活性成分是利多卡因(lidocaine)。

16.根据权利要求1所述的用途，其中待治疗的所述伤口是压疮、移植部位、外科手术伤口、溃疡、热烧伤、化学烧伤、电烧伤、撕裂伤、擦伤、刺伤、撕脱伤、血清肿和/或血肿。

17.根据权利要求16所述的用途，其中待治疗的所述伤口是糖尿病溃疡。

18.根据权利要求1所述的用途，其中所述微粉化粉末具有1μm至1000μm的粒径。

19.根据权利要求18所述的用途，其中所述微粉化粉末具有200μm至500μm的粒径。

20.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物促进经治疗的伤口中的血管生成得以改善，其中所述改善的血管生成是相对于未治疗的伤口和/或用牛胶原蛋白治疗的伤口而言的。