高效合成肌醇的马克斯克鲁维酵母工程菌及其应用
技术特征:
1.一种高效合成肌醇的马克斯克鲁维酵母代谢工程菌株,其特征在于,由如下步骤构建得到:
2.一种使用权利要求1所述的马克斯克鲁维酵母代谢工程菌株合成肌醇的方法,其特征在于,将马克斯克鲁维酵母代谢工程菌株作为发酵菌株,以葡萄糖、甘油、酵母提取物、蛋白胨成分为培养基,经培养发酵产生肌醇。
3.根据权利要求2所述的合成肌醇的方法,其特征在于,具体操作如下:将马克斯克鲁维酵母代谢工程菌株接种至50ml含有2%甘油的ypd培养基中,在30℃下,220rpm条件下培养168h;并在培养至96h时补加1ml 50%的甘油,在培养至96h时,每24h补加1ml50%的葡萄糖,发酵144h-168h,得到高产率肌醇。
4.根据权利要求2所述的合成肌醇的方法,其特征在于,具体操作如下:将含有2%甘油的ypd培养基的马克斯克鲁维酵母代谢工程菌株接种,以起10%种量接种至2%甘油的ypd培养基的发酵罐中,流加50%葡萄糖为第一碳源,流加50%的甘油为第二碳源,进行连续补料发酵,在连续补料发酵条件下,菌株高密度发酵168h-192h,得到高产率肌醇。
技术总结
本发明属于生物工程技术领域,具体为一种高效合成肌醇的马克斯克鲁维酵母工程菌及其应用。本发明的高效合成肌醇的马克斯克鲁维酵母工程菌,是在马克斯克鲁维酵母FIM1Δura3菌株中依次敲除葡萄糖‑6‑磷酸异构酶PGI基因、葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶ZWF1基因、肌醇加氧酶MIOX5基因以及肌醇转运蛋白ITR2基因,然后转入共表达布氏锥虫肌醇磷酸合酶TbIPS基因和大肠杆菌肌醇单磷酸酶EcIMP基因的载体pUKDN115‑Pinu‑EcIMP‑Ttef‑Ptef‑TbIPS‑Tinu所获得。本发明还公开高效制备肌醇的方法,即以所述马克斯克鲁维酵母工程菌株为发酵菌株,以葡萄糖、甘油、酵母提取物、蛋白胨等成分为培养基,经培养发酵产生肌醇,上清中肌醇产量可达到80.65g/L。
技术研发人员:周峻岗,吕红,兰青,余垚
受保护的技术使用者:复旦大学
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
文档序号 :
【 40001510 】
技术研发人员:周峻岗,吕红,兰青,余垚
技术所有人:复旦大学
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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