用于治疗子宫内膜异位症和其它良性妇科肿瘤的药剂

本发明涉及用于治疗和/或诊断子宫内膜异位症和其它良性妇科肿瘤性疾病或病症的药剂，还涉及能够在良性妇科肿瘤性疾病或病症中引发细胞毒性反应的药剂。

背景技术：

1、良性妇科肿瘤共有过多的成纤维细胞，这种疾病的实例包括子宫内膜异位症和子宫肌瘤(肌瘤)。子宫内膜异位症已被经典定义为子宫内膜上皮细胞和基质细胞的异位存在。然而，从最近的文献中有越来越多的证据表明，由于上皮细胞在一些病变中的低表达，这样的定义是不充分的。相同的研究指出，该疾病的纤维化性质是该疾病所有阶段的一致特征。这导致了数次将子宫内膜异位症重新定义为促纤维化疾病的呼吁(p vigano,etal.,human reproduction,volume 33,issue 3,march 2018,pages 347–352；sun-weiguo,patrick g groothuis,human reproduction update,volume 24,issue 5,september-october 2018,pages 577–598)。通过tnf-a和vegf靶向或其它途径干扰来解决子宫内膜异位症的纤维化和炎症途径的尝试在临床前和临床中取得了有限的成功。鉴于重复的组织损伤和修复导致成纤维细胞不可逆地分化为成肌纤维细胞，这种终末分化限制了成纤维细胞对其信号传导通路(例如，抗-tnf-a或tgf-b)的暂时改变的反应性。肌瘤中也存在类似的情况。

2、fap是脯氨酰基特异性丝氨酸蛋白酶大家族的一部分，其在健康和疾病中具有酶促和信号传导作用。这种蛋白与各种器官的纤维化、癌症和炎症有关，然而，它很少在正常组织中表达，这使其成为治疗的有吸引力的靶标。这是因为fap只在经历活性损伤和修复的组织中表达。已知fap也受癌症中雌激素表达的影响，并且雌激素是子宫内膜异位症的主要驱动因素之一。此外，fap已被证明参与了pten/pi3k/akt和ras-erk途径，这是在子宫内膜异位症中观察到的一些最常见的突变携带基因。

3、基于上述现有技术，本发明的目的是提供用于治疗良性妇科肿瘤性疾病或病症(如子宫内膜异位症和肌瘤)的方式和方法。此目的通过本说明书的独立权利要求的主题来实现，其中在从属权利要求、实施例、附图和本说明书的概述中描述了另外的有益实施方案。

技术实现思路

1、本发明人首次描述了fap的过量表达及其在治疗子宫内膜异位症和相关粘连以及其它良性妇科肿瘤(如肌瘤)中的用途。

2、本发明的第一方面涉及一种药剂，所述药剂包含：

3、a.能够特异性结合fap的配体/靶向部分；和

4、b.治疗部分，其中，所述治疗部分能够直接或通过募集免疫细胞间接触发在其细胞表面上表达fap的细胞的细胞死亡；

5、c.其中任选地，所述配体和所述免疫细胞募集部分通过肽接头相互连接(共价连接)，

6、具体地，用于治疗良性妇科肿瘤性疾病或病症。

7、本发明的第二方面涉及一种药剂，其中所述药剂包含：

8、a.靶蛋白结合部分(其中，所述靶蛋白在良性妇科肿瘤细胞中过表达)；

9、b.杀生物分子、细胞毒性分子、放射性同位素和/或免疫细胞募集部分，其中，所述免疫细胞募集部分能够特异性结合免疫细胞表面分子(其中，所述免疫细胞募集部分能够募集免疫细胞，特别是cd8+t细胞或nk细胞)；

10、c.能够保护所述免疫细胞募集部分和/或所述靶蛋白结合部分不与其靶标结合的掩蔽部分；

11、d.将所述掩蔽部分与所述药剂的其它组分连接的可切割接头，其中，所述可切割接头可被基质金属蛋白酶(mmp)2、9、10和/或26特异性切割(识别)；

12、特别是用于治疗良性妇科肿瘤。

13、本发明的第三方面涉及如前述任一方面所述的药剂。

14、本发明的第四方面涉及一种药剂，包含：

15、a.能够特异性结合fap的配体；

16、b.放射性同位素标记，

17、特别是用于诊断良性妇科肿瘤。

18、术语和定义

19、出于解释本说明书的目的，将应用以下定义，并且只要适当，以单数使用的术语也将包括复数，反之亦然。如果下面阐述的任何定义与通过引用并入本文的任何文件相冲突，则以阐述的定义为准。

20、本文使用的术语“包含(comprising)”、“具有(having)”、“含有(containing)”和“包括(including)”以及其它类似的形式及其语法上的等同物，意图在含义上是等同的，并且是开放式的，因为这些词语中的任何一个后面的一个或多个项目并不意味着是这一个或多个项目的详尽列举，或者不意味着仅限于所列出的一个或多个项目。例如，“包含”组分a、b和c的制品可以由组分a、b和c组成(即，仅包含组分a、b和c)，或者可以不仅包含组分a、b和c，还包含一种或多种其它组分。因此，旨在并理解“包含”及其类似形式及其语法等同物包括“基本上由……组成”或“由……组成”的实施方案的公开。

21、在提供值的范围的情况下，应当理解，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限和下限之间的每个中间值(至下限单位的十分之一)以及在所述范围内的任何其他所述值或中间值都涵盖在本公开内，但受到所述范围内的任何具体排除的极限的约束。当所述范围包括一个或两个极限时，排除这些所包括的极限中的一个或两个的范围也包括在本公开中。

22、本文中对“约”数值或参数的提及包括(并描述)针对该数值或参数本身的变化。例如，涉及“约x”的描述包括“x”的描述。

23、如本文所使用的，包括在所附权利要求中，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”包括复数指代对象。

24、除非另有定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语具有与本领域(例如，在细胞培养、分子遗传学、核酸化学、杂交技术和生物化学中)普通技术人员通常理解的含义相同的含义。标准技术用于分子、遗传、生物化学方法和化学方法(一般参见sambrook等人，molecular cloning:a laboratory manual,4th ed.(2012)cold spring harborlaboratory press,cold spring harbor,n.y.and ausubel et al.,short protocols inmolecular biology(2002)5th ed,john wiley&sons,inc.)。

25、本说明书上下文中的术语fap涉及脯氨酰基内肽酶fap或成纤维细胞活化蛋白α(uniprot id q 12884)。

26、在本说明书的上下文中，术语cd3涉及单独的t细胞表面糖蛋白cd3ε链(uniprotid p07766)及其天然存在的人异源二聚体形式(cd3ε和cd3δ(uniprot id p04234)异源二聚体、cd3ε和cd3γ异源二聚体(uniprot id p09693)以及cd3ε和cd3ζ异源二聚体(uniprotid p20963))。

27、本说明书的上下文中的术语cd16a涉及低亲和力免疫球蛋白γfc区受体iii-a(uniprot id p08637)。

28、在本说明书的上下文中，术语cd8涉及t细胞表面糖蛋白cd8α(uniprot idp01732)、t细胞表面糖蛋白cd8β(uniprot id p10966)以及它们在人类中天然存在的异源二聚体(cd8β和cd8α异源二聚体)。

29、本说明书的上下文中的术语okt3涉及如us6750325b1中所述的靶向cd3的重组抗体，其通过引用并入本文。

30、序列

31、与本文公开的序列相似或同源(例如，至少约70％序列同一性)的序列也是本发明的一部分。在一些实施方案中，氨基酸水平的序列同一性可以是约80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高。在核酸水平，序列同一性可以是约70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高。可替代地，当核酸片段在选择性杂交条件下(例如，非常严格的杂交条件)与链的互补物杂交时，存在实质上的同一性。核酸可以以完整细胞、细胞裂解物或部分纯化的或基本纯的形式存在。

32、在本说明书的上下文中，术语序列同一性和序列同一性的百分比是指代表序列比较结果的单一定量参数，所述序列比较是通过逐位置比较两个比对序列而确定的。用于比较的序列比对方法是本领域众所周知的。用于比较的序列比对可以通过smith和waterman(adv.appl.math.2:482(1981))的局部同源性算法、通过needleman和wunsch(j.mol.biol.48:443(1970))的全局比对算法、通过pearson和lipman(proc.nat.acad.sci.85:2444(1988))的相似性搜索方法或通过这些算法的计算机化实现来进行，包括但不限于：clustal、gap、bestfit、blast、fasta和tfasta。用于实施blast分析的软件可公开获得，例如通过国家生物技术信息中心(national center forbiotechnology-information，http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/)。

33、比较氨基酸序列的一个实例是使用默认设置的blastp算法：期望阈值：10；字长：3；查询范围内的最大匹配数：0；矩阵：blosum62；缺口成本：存在11，扩展1；成分调整：条件成分得分矩阵调整。比较核酸序列的一个此类实例是使用默认设置的blastn算法：期望阈值：10；字长：28；查询范围内的最大匹配数：0；匹配/不匹配得分：1.-2；缺口成本：线性。除非另有说明，否则本文提供的序列同一性值是指：使用blast程序套件(altschul et al.,j.mol.biol.215:403-410(1990))，分别使用上述蛋白质和核酸比较的默认参数获得的值。

34、在没有规定百分比值的情况下对同一序列的提及意味着100％同一性的序列(即相同的序列)。

35、普通生物化学：肽、氨基酸序列

36、在本说明书的上下文中，术语多肽涉及由50个或更多个形成线性链的氨基酸组成的分子，其中氨基酸通过肽键连接。多肽的氨基酸序列可以代表完整(生理学上发现的)蛋白质或其片段的氨基酸序列。术语“多肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，并且包括蛋白质及其片段。多肽在本文中公开为氨基酸残基序列。

37、本说明书上下文中的术语肽涉及由多达50个氨基酸，特别是8至30个氨基酸，更特别是8至15个氨基酸组成的分子，其形成线性链，其中氨基酸通过肽键连接。

38、氨基酸残基序列从氨基到羧基末端给出。序列位置的大写字母是指单字母代码中的l-氨基酸(stryer，biochemistry，第3版，第21页)。氨基酸序列位置的小写字母是指相应的d-氨基酸或(2r)-氨基酸。序列按从氨基到羧基末端的方向从左到右书写。根据标准命名法，氨基酸残基序列由三个字母或单个字母的代码命名，如下所示：丙氨酸(ala，a)、精氨酸(arg，r)、天冬酰胺(asn，n)、天冬氨酸(asp，d)、半胱氨酸(cys，c)、谷氨酰胺(gln，q)、谷氨酸(glu，e)、甘氨酸(gly，g)、组氨酸(his，h)、异亮氨酸(ile，i)、亮氨酸(leu，l)、赖氨酸(lys，k)、甲硫氨酸(met，m)、苯丙氨酸(phe，f)、脯氨酸(pro，p)、丝氨酸(ser，s)、苏氨酸(thr，t)、色氨酸(trp，w)、酪氨酸(tyr，y)以及缬氨酸(val，v)。

39、在本说明书的上下文中，术语氨基酸接头或肽接头是指可变长度的多肽，其用于连接两个多肽以产生单链多肽。用于实施本文所述发明的接头的示例性实施方案是由1、2、3、4、5、10、20、30、40或50个氨基酸组成的寡肽链。氨基酸接头的非限制性实例是四甘氨酸-丝氨酸肽接头的单体或二聚体、三聚体或四聚体。

40、普通分子生物学：核酸序列，表达

41、术语基因表达或表达，或可替代的术语基因产物，可以指核酸(rna)产生或肽或多肽产生的过程(及其产物)之一或两者，也分别指转录和翻译，或者调节遗传信息的处理以产生多肽产物的任何中间过程。术语基因表达也可以应用于rna基因产物的转录和处理，例如调节rna或结构(例如核糖体的)rna。如果表达的多核苷酸来源于基因组dna，则表达可以包括真核细胞中mrna的剪接。可以在转录和翻译水平上测定表达，换言之，mrna和/或蛋白质产物。

42、结合；结合物配体抗体：

43、在本发明的上下文中，术语“特异性结合”是指配体以一定的亲和力和靶向特异性与其靶标结合的性质。这种配体的亲和力由配体的解离常数表示。当与其靶标结合时，特异性反应性配体的解离常数≤5×10-7mol/l，特别是≤10-8mol/l，更特别是≤10-9mol/l，但是在其与具有与靶标整体相似的化学组成但不同的三维结构的分子的相互作用中，解离常数高至少三个数量级。

44、术语“适体”涉及结合特定靶分子的寡核苷酸或肽分子。适体可以通过从大的随机序列库中选择它们来产生。核酸适体可以通过体外选择或等效的selex(通过指数富集的配体系统进化)的重复循环以通过非共价相互作用结合分子靶标，如小分子、蛋白质或核酸来产生。适体提供了与抗体相媲美的分子识别特性。

45、在本说明书的上下文中，术语抗体指完整抗体，包括但不限于免疫球蛋白g型(igg)、a型(iga)、d型(igd)、e型(ige)或m型(igm)、任何抗原结合片段或其单链以及相关的或衍生的构建体。完整抗体是糖蛋白，其包含至少两条重链(h链)和两条轻链(l链)，它们通过二硫键相互连接。每条重链由重链可变区(vh)和重链恒定区(ch)组成。igg的重链恒定区由三个结构域ch1、ch2和ch3组成。每条轻链由轻链可变区(本文缩写为vl)和轻链恒定区(cl)组成。轻链恒定区由一个结构域cl组成。重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包含免疫系统的不同细胞(例如，效应细胞)以及经典补体系统的第一组分。类似地，该术语包括所谓的纳米抗体或单结构域抗体，由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段。

46、在本说明书的上下文中，术语人源化抗体指最初由非人类物种的免疫细胞产生的抗体，其蛋白质序列已经被修饰以增加其与人类天然产生的抗体变体的相似性。本文使用的术语人源化抗体包括这样的抗体，其中，来源于另一种哺乳动物物种(如美洲驼)的种系的cdr序列已经被移植到人类框架序列。可以在人类框架序列以及来源于另一种哺乳动物种系的cdr序列中进行额外的框架区修饰。

47、本说明书上下文中的术语抗体样分子是指能够以高亲和力/kd≤10e-6mol/l特异性结合另一分子或靶标的分子。抗体样分子与它的靶标结合类似于抗体的特异性结合。术语抗体样分子包括重复蛋白，如设计的锚蛋白重复蛋白(molecular partners，zürich)，一种表现出高度特异性和高亲和力靶蛋白结合的工程抗体模拟蛋白(参见us2012142611、us2016250341、us2016075767和us2015368302，所有这些文献通过引用并入本文)。术语抗体样分子还包括但不限于来源于犰狳重复蛋白的多肽、来源于富含亮氨酸重复蛋白的多肽和来源于四肽重复蛋白的多肽。术语抗体样分子还包括：衍生自蛋白a结构域的特异性结合多肽、纤连蛋白结构域fn3、共有纤连蛋白结构域、脂质运载蛋白(skerra,biochim.biophys.acta 2000,1482(1-2):337-50)、衍生自锌指蛋白的多肽(kwan etal.structure 2003,11(7):803-813)、src同源性结构域2(sh2)或src同源性结构域3(sh3)、pdz结构域、γ-晶体蛋白、泛素、半胱氨酸结多肽或半胱氨酸结肽(knottin)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、sac7d、三螺旋卷曲螺旋(也称为α抗体)、kunitz结构域或kunitz型蛋白酶抑制剂和碳水化合物结合模块32-2。

48、术语蛋白a结构域衍生的多肽是指作为蛋白a的衍生物并且能够特异性结合免疫球蛋白的fc区和fab区的分子。

49、术语犰狳重复蛋白是指包含至少一个犰狳重复片段的多肽，其中，犰狳重复片段的特征在于形成发夹结构的一对α螺旋。

50、术语单结构域抗体是指只有重链的抗体、vhh或纳米抗体。

51、术语单链可变片段(scfv)是指重组分子，其中编码抗原结合结构域的免疫球蛋白轻链和重链的可变区被工程化为单个多肽。

52、在本说明书的上下文中，术语人源化骆驼抗体(camelid antibody)是指仅由重链或重链的可变结构域(vhh结构域)组成的抗体，并且其氨基酸序列已被修饰以增加其与人类中天然产生的抗体的相似性，因此当施用于人类时显示降低的免疫原性。使骆驼抗体人源化的一般策略显示于vincke等人(“general strategy to humanize a camelidsingle-domain antibody and identification of a universal humanized nanobodyscaffold”,j biol chem.2009jan30；284(5):3273-3284)和us2011165621a1中。

53、在本说明书的上下文中，术语片段可结晶(fc)区以其在细胞生物学和免疫学领域中已知的含义使用；它是指抗体的一部分，如果应用于igg，其包含由二硫键共价连接的ch2和ch3结构域组成的两个相同的重链片段。

54、如本文所用，术语药物组合物是指本发明的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物以适于局部施用、肠胃外施用或注射施用的形式提供。

55、如本文所用，术语药学上可接受的载体包括本领域技术人员已知的任何溶剂、分散介质、包衣、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如，抗细菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、保存剂、药物、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染料等及其组合(参见例如remington:the science and practice of pharmacy，isbn0857110624)。

56、如本文所用，在一个实施方案中，术语治疗(treating)或治疗(treatment)任何疾病或病症(例如子宫内膜异位症)是指改善疾病或病症(例如减缓或抑制或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是指减轻或改进至少一种物理参数，包括那些患者可能无法辨别的参数。在另一个实施方案中，“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”是指调节疾病或病症，或者在物理上(例如，稳定可辨别的症状)、在生理上(例如，稳定物理参数)，或者两者都有。除非在下文中具体描述，否则评估疾病的治疗和/或预防的方法通常是本领域已知的。

57、在本说明书的上下文中，术语免疫细胞涉及能够(直接或间接)杀伤机体细胞和/或诱导其凋亡的免疫系统细胞。免疫细胞的实例是cd8+细胞或自然杀伤细胞(nk细胞)。

58、在本说明书的上下文中，术语免疫细胞表面分子涉及一种分子，特别是一种蛋白质，其位于免疫细胞的细胞表面，并且可被其它部分接近。

59、在本说明书的上下文中，术语募集免疫细胞涉及本发明的分子使免疫细胞与子宫内膜异位症的细胞紧密接触从而募集免疫细胞的能力。

60、本说明书上下文中的术语“大体积蛋白质(bulk protein)”涉及血液中以大体积的量存在的任何蛋白质(>血液的1％)。大体积蛋白质的实例是白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原。

61、本说明书上下文中的术语可检测的表达涉及由细胞表达的蛋白质的量。如果通过标准细胞生物学方法，蛋白质在至少一个亚群的细胞表面上是可检测的，则认为是可检测的表达。

62、本说明书上下文中的术语保护(shielding)涉及掩蔽部分的性质。掩蔽部分能够与药剂的某一部分非共价相互作用，从而只要掩蔽部分共价连接到该药剂，就能防止该其它部分与其实际靶标结合。

63、在本说明书的上下文中，术语子宫内膜异位症或异位子宫内膜涉及其中与子宫内膜(通常覆盖子宫内部的组织层)中的细胞相似的细胞在子宫外生长的任何疾病。子宫内膜异位症最常见的部位是卵巢，其次是道格拉斯窝、阔韧带的后叶和骶子宫韧带。本发明中的子宫内膜异位症涉及所有亚型或可替代的命名，包括但不限于子宫腺肌症、子宫内膜瘤、深部浸润性子宫内膜异位症、浅表腹膜子宫内膜异位症和腹壁子宫内膜异位症。

64、术语子宫肌瘤(urine fibroids)、平滑肌瘤或肌瘤(myoma)是女性生殖器官内和周围的纤维化和子宫肌肉生长物。子宫肌瘤通常与子宫内膜异位症一起发生。子宫肌瘤的主要细胞群类似于子宫内膜异位症，但起始细胞是子宫肌细胞，这与子宫内膜异位症中的子宫内膜上皮细胞相反。

65、术语良性妇科肿瘤或肿瘤性疾病是指非癌性细胞的异常生长。良性妇科肿瘤描述了通常在女性生殖器官内和周围发现的组织在该器官本身或其它器官上异常生长的情况。例如，子宫内膜异位症是子宫内膜样细胞群在其它器官上的异常生长，然后导致患者疼痛和其它症状。肌瘤或子宫肌瘤是良性妇科肿瘤的其它实例。

66、本发明的详细描述

67、本发明的第一方面涉及一种药剂，所述药剂包含：

68、a.能够特异性结合fap的配体/靶向部分；和

69、b.治疗部分，其中，所述治疗部分能够直接或通过募集免疫细胞间接触发在其细胞表面上表达fap的细胞的细胞死亡；

70、c.其中任选地，所述配体和所述免疫细胞募集部分通过肽接头相互连接(共价连接)，

71、具体地，用于治疗良性妇科肿瘤性疾病或病症。

72、在某些实施方案中，所述治疗部分能够诱导在其细胞表面上表达fap的细胞的细胞死亡。诱导细胞死亡可以通过不同的机制实现。

73、在某些实施方案中，所述治疗部分是杀生物分子、细胞毒性分子和/或免疫细胞募集部分，其中，所述免疫细胞募集部分能够特异性结合免疫细胞表面分子(其中，所述免疫细胞募集部分能够募集免疫细胞，特别是cd8+t细胞或nk细胞)。

74、在某些实施方案中，所述治疗部分是免疫细胞募集部分，其中，所述免疫细胞募集部分能够特异性结合免疫细胞表面分子。

75、在某些实施方案中，所述免疫细胞表面分子选自：

76、a)cd3；

77、b)cd16；

78、c)cd8；

79、在某些实施方案中，所述免疫细胞表面分子是cd3。

80、在某些实施方案中，所述免疫细胞募集部分选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段、适体、非免疫球蛋白支架、小分子和抗体样分子的组。在某些实施方案中，所述免疫细胞募集部分是单结构域抗体。在某些实施方案中，所述免疫细胞募集部分选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段的组。在某些实施方案中，所述免疫细胞募集部分是单结构域抗体。

81、在某些实施方案中，所述治疗部分是分子量<1000道尔顿(da)的细胞毒性分子。在某些实施方案中，所述治疗部分是分子量≤800da的细胞毒性分子。在某些实施方案中，所述治疗部分是分子量≤500da的细胞毒性分子。

82、在某些实施方案中，所述细胞毒性分子选自包括以下的组：阿霉素、洋红霉素、柔红霉素、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、甲喋呤、二氯甲氨蝶呤、丝裂霉素c、泊非霉素、5-氟脲嘧啶、6-巯基嘌呤、胞嘧啶阿拉伯糖苷、鬼臼毒素、依托泊苷、磷酸依托泊苷、美法仑、长春碱、长春新碱、异长春碱、长春地辛、雌莫司汀、顺铂、环磷酰胺、环氧长春碱(leurosine)、紫杉醇(taxol)、去乙酰基长春碱、环磷酰胺、异环磷酰胺、阿糖胞苷、6-硫鸟嘌呤、苯丁酸氮芥、卡莫司汀、米托蒽醌、紫杉醇(paclitaxel)或其细胞毒性衍生物。

83、在某些实施方案中，能够特异性结合fap的配体选自包含以下的组：抗体、抗体片段、单链抗原结合片段、适体、非免疫球蛋白支架、抗体样分子、单结构域抗体、遵守里宾斯基五规则(lipinski rules of five set of criteria)的小分子药物(≤1000da，特别是≤800da，更特别是≤500da)、小肽和fap特异性底物(例如，(多)肽-脯氨酸-亮氨酸/天冬酰胺/氨基三氟甲基香豆素-(多)肽)。在某些实施方案中，所述配体选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段的组。在某些实施方案中，所述配体是单结构域抗体。

84、在某些实施方案中，所述药剂包含掩蔽部分，其通过接头连接(共价连接)到药剂的其余部分，其中所述掩蔽部分能够降低或消除配体和/或免疫细胞募集部分的结合能力(并阻止免疫细胞结合部分或配体与其靶标结合)。在某些实施方案中，接头包含蛋白酶切割位点(可切割接头)。

85、掩蔽方法是可以允许更好的治疗窗口的添加。

86、在某些实施方案中，所述药剂包含大体积蛋白结合位点，其中，所述结合位点通过接头连接(共价连接)到所述药剂的其余部分。在某些实施方案中，接头包含蛋白酶切割位点。在某些实施方案中，大体积蛋白结合位点是人类血清白蛋白结合位点。

87、在某些实施方案中，蛋白酶切割位点可被基质金属蛋白酶2、9、10和/或26特异性切割(识别)。

88、在某些实施方案中，所述药剂的两种、三种或所有组分通过肽接头彼此共价连接。在某些实施方案中，每个肽接头序列独立地选自序列seq id no:5至seq id no:15、erk、(gs)n(seq id no:18)、(g2s)n(seq id no:19)、(g3s)n(seq id no:20)、(g4s)n(seq id no:21)，其中n是选自1至10的整数，其中g是甘氨酸，s是丝氨酸，e是谷氨酸，r是精氨酸，而k是赖氨酸。在特定实施方案中，n是1、2、3或4。

89、在某些实施方案中，良性肿瘤组织的特征在于靶蛋白的可检测表达。在某些实施方案中，至少1％的良性肿瘤细胞表达靶蛋白。

90、在某些实施方案中，能够特异性结合fap的配体的特征在于seq id no:16的序列。

91、在某些实施方案中，免疫细胞表面分子是cd3，治疗部分的特征在于seq id no:17的序列。

92、本发明的第二方面涉及一种药剂，其中所述药剂包含：

93、a.靶蛋白结合部分(其中，所述靶蛋白在良性妇科肿瘤细胞中过表达)；

94、b.杀生物分子、细胞毒性分子、放射性同位素和/或免疫细胞募集部分，其中，所述免疫细胞募集部分能够特异性结合免疫细胞表面分子(其中，所述免疫细胞募集部分能够募集免疫细胞，特别是cd8+t细胞或nk细胞)；

95、c.能够保护所述免疫细胞募集部分和/或所述靶蛋白结合部分不与其靶标结合的掩蔽部分；

96、d.将所述掩蔽部分与所述药剂的其它组分连接的可切割接头，其中，所述可切割接头可被基质金属蛋白酶(mmp)2、9、10和/或26特异性切割(识别)；

97、特别是用于治疗良性妇科肿瘤。

98、在本发明第二方面的某些实施方案中，所述可切割接头可被mmp 2和/或9特异性切割(识别)。

99、在第二方面的某些实施方案中，所述可切割接头的特征在于选自seq id no:1-4的序列。

100、在第二方面的某些实施方案中，所述掩蔽部分能够保护免疫细胞募集部分不与其靶标结合。

101、在某些实施方案中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫内膜异位症。在某些实施方案中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫肌瘤的发生。

102、在某些实施方案中，所述药剂被配制用于皮下注射或静脉注射。

103、本发明的第三方面涉及如前述任一方面所述的药剂。

104、本发明的第四方面涉及一种药剂，包含：

105、a.能够特异性结合fap的配体；

106、b.放射性同位素标记，

107、特别是用于诊断良性妇科肿瘤。

108、在某些实施例中，所述放射性同位素标记选自包括以下的组：94mtc、186re、203pb、47sc、111in、97ru、62cu、88y、121sn、161tb、153sm、166ho、105rh。

109、在某些实施方案中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫内膜异位症。在某些实施方案中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫肌瘤的发生。

110、如上所述的药剂或其缀合物可用于良性肿瘤的成像、检测、诊断。

111、在某些实施例中，所述诊断是体内诊断。

112、在某些实施例中，所述诊断是射线照相术。在某些实施例中，所述诊断选自x射线、pet、ct。

113、序列

114、

115、

116、

117、医学治疗

118、类似地，在本发明的范围内的是一种在需要其的患者中治疗良性妇科肿瘤的方法，其包括向所述患者施用根据上述描述的药剂。

119、在某些实施方案中，药剂是抗体、抗体片段、抗体样分子或蛋白a结构域衍生的多肽。

120、在一些实施方案中，多肽药剂是由两条重链和两条轻链组成的免疫球蛋白。在一些实施方案中，多肽配体是单结构域抗体，由来源于重链或轻链的分离的可变结构域组成。在一些实施方案中，非激动剂多肽配体是仅由重链组成的重链抗体，如在骆驼科中发现的抗体。

121、在某些实施方案中，药剂是抗体片段。在某些实施方案中，多肽药剂是fab片段，即抗体的抗原结合片段，或单链可变片段，即通过肽接头连接的抗体的重链和轻链的可变区的融合蛋白。

122、药物组合物、施用/剂型和盐

123、根据本发明的化合物的一方面，根据本发明的化合物被提供作为药物组合物、药物施用形式或药物剂型。

124、在本发明的某些实施方案中，本发明的化合物通常被配制成药物剂型，以提供易于控制的药物剂量，并为患者提供精美且易于操作的产品。

125、类似地，提供了用于预防或治疗子宫内膜异位症的剂型，其包含根据本发明的任何上述方面或实施方案的非激动剂配体或反义分子。

126、本发明还包括一种药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。在进一步的实施方案中，组合物包含至少两种药学上可接受的载体，如本文所述的那些。

127、本发明的某些实施方案涉及肠胃外施用的剂型，如皮下、静脉内、肝内或肌内注射形式。任选地，可以存在药学上可接受的载体和/或赋形剂。

128、本发明的化合物的剂量方案将根据已知因素而变化，如特定药剂的药效动力学特征及其施用方式和途径；接受者的物种、年龄、性别、健康状况、医学状况和体重；症状的性质和程度；并行治疗的种类；治疗的频率；施用途径、患者的肾功能和肝功能以及期望的效果。在某些实施方案中，本发明的化合物可以以单次每日剂量施用，或者总每日剂量可以以每日两次、三次或四次的分剂量施用。

129、在某些实施方案中，对于约50-70kg的受试者，本发明的药物组合物或组合可以是约1-1000mg活性成分的单位剂量。化合物、药物组合物或其组合的治疗有效剂量取决于受试者的物种、体重、年龄和个体状况、所治疗的病症或疾病或其严重程度。具有普通技术的医生、临床医生或兽医可以容易地确定用于预防、治疗或抑制病症或疾病进展所需的每种活性成分的有效量。

130、本发明的药物组合物可以进行常规的药学操作，如杀菌和/或可以含有常规的惰性稀释剂、润滑剂或缓冲剂，以及佐剂，如防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂和缓冲剂等。它们可以通过标准方法生产，例如通过常规的混合、造粒、溶解或冻干方法。许多用于制备药物组合物的此类程序和方法是本领域已知的，参见例如l.lachman等人(the theory andpractice of industrial pharmacy,4th ed,2013(isbn 8123922892))。

131、根据本发明的制造方法和治疗方法

132、作为另一方面，本发明还包括如上文详述的本文所鉴定的药剂或其药学上可接受的盐在制备用于治疗或预防良性妇科肿瘤(特别是子宫内膜异位症或子宫肌瘤)的药物的方法中的用途。

133、类似地，本发明包括已被诊断患有良性妇科肿瘤相关疾病(特别是子宫内膜异位症或子宫肌瘤)的患者的治疗方法。如上文详述的，该方法需要给患者施用有效量的本文所鉴定的药剂或其药学上可接受的盐。

134、无论单个可分离特征，例如接头类型或配体蛋白或医学指征的替代物在本文中作为“实施方案”列出，应理解这些替代物可以自由组合以形成本文公开的本发明的随机实施方案。因此，接头类型的任何可替代的实施方案可以与配体的任何可替代的实施方案组合，并且这些组合可以与本文提及的任何医学指征组合。

135、该申请还涵盖以下项目：

136、项目

137、1.一种药剂，包含：

138、a.能够特异性结合fap的配体；

139、和

140、b.治疗部分，其中，所述治疗部分能够触发在其细胞表面上表达fap的细胞的细胞死亡；

141、用于治疗良性妇科肿瘤性疾病。

142、2.根据项目1所述使用的药剂，其中，所述治疗部分是免疫细胞募集部分，其中，所述免疫细胞募集部分能够特异性结合免疫细胞表面分子。

143、3.根据项目2所述使用的药剂，其中，所述免疫细胞表面分子选自包括以下的组：

144、a.cd3；

145、b.cd16；

146、c.cd8；

147、具体地其中，所述免疫细胞表面分子是cd3。

148、4.根据前述项目2或3中任一项所述使用的药剂，其中，所述免疫细胞募集部分选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段、单结构域抗体、适体、非免疫球蛋白支架和抗体样分子的组，

149、具体地其中，所述免疫细胞募集部分选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段的组，更具体地其中，所述免疫细胞募集部分是单结构域抗体。

150、5.根据项目1所述使用的药剂，其中，所述治疗部分是分子量<1000道尔顿(da)的细胞毒性分子，具体地，分子量≤800da，更具体地，分子量≤500da。

151、6.根据项目5所述使用的药剂，其中，所述细胞毒性分子选自包括以下的组：阿霉素、洋红霉素、柔红霉素、氨基蝶呤、甲氨蝶呤、甲喋呤、二氯甲氨蝶呤、丝裂霉素c、泊非霉素、5-氟脲嘧啶、6-巯基嘌呤、胞嘧啶阿拉伯糖苷、鬼臼毒素、依托泊苷、磷酸依托泊苷、美法仑、长春碱、长春新碱、异长春碱、长春地辛、雌莫司汀、顺铂、环磷酰胺、环氧长春碱、泰素(taxol)、去乙酰基长春碱、环磷酰胺、异环磷酰胺、阿糖胞苷、6-硫鸟嘌呤、苯丁酸氮芥、卡莫司汀、米托蒽醌、紫杉醇(paclitaxel)或其细胞毒性衍生物。

152、7.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述配体选自包括以下的组：抗体、抗体片段、单链抗原结合片段、单结构域抗体、适体、非免疫球蛋白支架和抗体样分子、遵守里宾斯基五规则的小分子药物、肽和fap特异性底物，

153、具体地其中，所述配体选自包含抗体、抗体片段、单链抗原结合片段的组，

154、更具体地其中，所述配体是单结构域抗体。

155、8.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述药剂包含经由接头连接到所述药剂的掩蔽部分，其中，所述掩蔽部分能够降低或消除所述配体和/或所述免疫细胞募集部分的结合能力，具体地其中，所述接头包含蛋白酶切割位点。

156、9.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述药剂包含大体积蛋白质结合位点，尤其是人血清白蛋白结合位点，其中，所述结合位点经由接头连接到所述药剂，具体地其中，所述接头包含蛋白酶切割位点。

157、10.根据项目8或9所述使用的药剂，其中，所述蛋白酶切割位点可被基质金属蛋白酶2、9、10和/或26特异性切割。

158、11.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述药剂中的两种、三种或所有组分通过肽接头彼此共价连接，具体地其中，每个肽接头序列独立地选自序列seq idno:5至seq id no:15、erk、(gs)n(seq id no:18)、(g2s)n(seq id no:19)、(g3s)n(seq idno:20)、(g4s)n(seq id no:21)，其中n是选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的整数。

159、12.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述子宫内膜异位症的组织的特征在于可检测的fap的表达，具体地其中至少1％的子宫内膜异位症的细胞表达fap。

160、13.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，能够特异性结合fap的配体的特征在于seq id no:16的序列。

161、14.根据前述项目2-4或7-13中任一项所述使用的药剂，其中，免疫细胞表面分子是cd3，治疗部分的特征在于seq id no:17的序列。

162、15.一种用于治疗良性妇科肿瘤性疾病的药剂，其中所述药剂包含：

163、a.靶蛋白结合部分；

164、b.免疫细胞募集部分；

165、c.能够保护所述免疫细胞募集部分和/或所述靶蛋白结合部分不与其靶标结合的掩蔽部分；

166、d.将所述掩蔽部分与所述药剂的其它组分连接的可切割接头，其中，所述可切割接头可被基质金属蛋白酶(mmp)2、9、10和/或26特异性切割。

167、16.根据项目15所述使用的药剂，其中，所述可切割接头可被mmp 2或mmp 9特异性切割。

168、17.根据项目15或16所述使用的药剂，其中，所述可切割接头的特征在于选自seqid no:1至seq id no:4的序列。

169、18.根据项目15-17所述使用的药剂，其中，所述掩蔽部分能够保护免疫细胞募集部分不与其靶标结合。

170、19.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫内膜异位症。

171、20.根据前述项目1-18中任一项所述使用的药剂，其中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫肌瘤的发生。

172、21.根据前述项目中任一项所述使用的药剂，其中，所述药剂被配制用于皮下注射或静脉注射。

173、22.根据前述项目中任一项所述的药剂。

174、23.一种药剂，包含：

175、a.能够特异性结合fap的配体；

176、b.放射性同位素标记。

177、24.根据项目23所述的药剂，其中，所述放射性同位素标记选自包括以下的组：94mtc、186re、203pb、47sc、111in、97ru、62cu、88y、121sn、161tb、153sm、166ho、105rh。

178、25.根据项目23或24的药剂，用于诊断良性妇科肿瘤性疾病。

179、26.根据项目25所述使用的药剂，其中，所述良性妇科肿瘤性疾病为子宫内膜异位症或子宫肌瘤。

180、27.根据权利要求25-26所述使用的药剂，其中，所述诊断是体内诊断。

181、28.根据权利要求25-27所述使用的药剂，其中，所述诊断为放射线照相术，具体地，所述诊断选自x射线、pet、ct。

182、通过下面的实施例和附图进一步说明本发明，从中可以得出进一步的实施方案和优点。这些实施例旨在说明本发明，而不是限制其范围。