一种用于生物合成吲哚丙酸的重组载体、工程菌及其应用的制作方法
技术特征:
1.一种用于生物合成吲哚丙酸的重组载体,其特征在于,所述重组载体在表达载体上构建表达了邻氨基苯甲酸合成酶基因trped、融合的吲哚-3-甘油磷酸合酶/磷酸核糖邻氨基苯甲酸异构酶基因trpc和色氨酸合成酶基因trpba以及苯酰辅酶a脱水酶亚基基因fldc。
2.根据权利要求1所述的重组载体,其特征在于,所述表达载体包括载体pet-28a(+);
3.一种工程菌,其特征在于,所述工程菌包含权利要求1所述的重组载体。
4.根据权利要求3所述的工程菌,其特征在于,所述工程菌的宿主细菌包括大肠杆菌。
5.权利要求1所述的重组载体或权利要求3所述的工程菌在生物合成吲哚丙酸中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述应用为:以胞内合成的l-色氨酸为前体生物合成吲哚丙酸。
7.一种生物合成吲哚丙酸的方法,其特征在于,所述方法为:采用权利要求3所述的工程菌发酵生产吲哚丙酸。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述发酵方法包括:
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述第一次摇床培养和第二次摇床培养的条件为:在37℃、220rpm的条件下培养;所述发酵培养基为液体lb培养基。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述第三次摇床培养的条件为:在30℃、220rpm的条件下培养;
技术总结
本发明提供了一种用于生物合成吲哚丙酸的重组载体、工程菌及其应用,属于生物工程技术领域;本发明利用微生物代谢工程和合成生物学的方法,构建了一种用于合成吲哚丙酸的重组载体,所述重组载体包含邻氨基苯甲酸合成酶基因trpED、融合的吲哚‑3‑甘油磷酸合酶/磷酸核糖邻氨基苯甲酸异构酶基因trpC和色氨酸合成酶基因trpBA以及苯酰辅酶A脱水酶亚基fldC基因;将所述重组载体转化至E.coli BL21(DE3)胞内实现以上四个基因的过表达,获得用于生物合成吲哚丙酸的工程菌,所述工程菌能够稳定大量合成吲哚丙酸,具有广阔的应用前景。
技术研发人员:李珮铷,辛向东,吴万明,沈瑞
受保护的技术使用者:镇江市天益生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
文档序号 :
【 40000596 】
技术研发人员:李珮铷,辛向东,吴万明,沈瑞
技术所有人:镇江市天益生物科技有限公司
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
声 明 :此信息收集于网络,如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们,我们会在第一时间删除
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