一种基于电化学联合酶偶联法制备NAD+的方法与流程

1.一种nox氧化酶突变体，所述nox氧化酶突变体选自如seq id no:1所示的氨基酸序列在第40位、第42位中的至少一个氨基酸处的突变；优选地，如seq id no:1所示的氨基酸序列在第40位突变为色氨酸；如seq id no:1所示的氨基酸序列在第42位突变为甘氨酸或丙氨酸；优选地，所述nox氧化酶突变体的氨基酸序列如seq id no:2、seq id no:3或seqid no:4所示。

2.与权利要求1所述的nox氧化酶突变体相关的生物材料，所述生物材料为下述任一种：

3.一种酶电极，所述酶电极包含nox氧化酶、偶联剂、基底电极。

4.根据权利要求3所述的酶电极，其特征在于，所述基底电极包括玻碳电极、碳布电极、碳纸电极、泡沫镍电极或泡沫铜电极；优选地，所述偶联剂包括壳聚糖、萘酚、戊二醛、聚乙烯亚胺和/或聚二烯二甲基氯化铵。

5.根据权利要求3所述的酶电极，其特征在于，所述nox氧化酶包括野生型nox氧化酶或nox氧化酶突变体，所述nox氧化酶突变体包括权利要求1或2所述的nox氧化酶突变体；所述野生型nox氧化酶包括产水型nox氧化酶，优选为lmnox。

6.权利要求3～5任一项所述酶电极的制备方法，包括以下步骤：将偶联剂、nox氧化酶混合均匀形成复合溶液，将复合溶液置于基底电极表面，形成酶电极。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述复合溶液中偶联剂的终浓度为0.1～0.5％(w/v)；优选地，所述复合溶液中nox氧化酶的终浓度为5～25mg/ml。

8.一种酶电化学反应器，所述酶电化学反应器采用三电极体系，以权利要求3～5任一项所述的酶电极为工作电极；优选地，所述酶电化学反应器中包括电解池、电解质溶液；所述电解质溶液包括底物、电子中介体。

9.根据权利要求8所述的酶电化学反应器，其特征在于，所述电子介体包括二茂铁甲酸fcca或其衍生物、萘醌类或其衍生物、甲苯胺蓝tbo和/或血红素；优选地，所述底物包括nad(p)h；

10.一种制备nad(p)+的方法，具体为采用权利要求8或9所述的电化学反应器进行反应制备nad(p)+。