一种双心疾病慢性应激合并AS心肌损伤动物模型的构建方法

本发明属于疾病动物模型构建方法，具体涉及一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法。

背景技术：

1、以动脉粥样硬化性心血管疾病(ascvd)为主导的脑血管疾病(cvd)是我国城乡居民的首要致死原因，占城乡居民死因构成比的40％以上。ascvd患者罹患抑郁症的风险是普通人群的三倍，且动脉粥样硬化(as)与抑郁症的共病率高达40％。而现有研究中，陈晨等人通过给雄性apoe-/-小鼠喂食高脂饲料同时cums 8周构建了动脉粥样硬化(as)合并抑郁的小鼠模型，以探究抑郁对as小鼠主动脉斑块发展及体内炎症水平的影响。而曹洪福等人的研究则进一步细分，以apoe-/-小鼠为对象，分别设置普通饮食加cums作为抑郁组、高脂饮食组为冠心病组、高脂饮食加cums作为冠心病合并抑郁组，对比分析小鼠主动脉中nlrp3炎症小体的变化及海马神经元的凋亡情况。目前，还未有模型能够模拟反映慢性应激加重动脉粥样硬化心肌损伤的。

技术实现思路

1、本发明的目的在于，针对现有技术的上述不足，提供了一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法，尤其是慢性应激加重动脉粥样硬化状态下心肌损伤，为双心疾病的发病机制、病理特征、治疗方法研究和开发提供新的动物模型。

2、为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

3、本发明的第一目的是提供一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法，包括如下步骤：

4、s1、随机挑选apoe-/-小鼠高脂喂养，喂养预设时间后，进行动脉粥样硬化模型评估，确认apoe-/-小鼠的as造模成功；

5、s2、对步骤s1得到的患as疾病的apoe-/-小鼠施加不同的应激刺激，并于应激刺激实施的第0、2、4、6周周末进行旷场实验及糖水偏好实验，确认得到慢性应激合并as心肌损伤动物模型。

6、进一步的，所述apoe-/-小鼠的体重为18-20g。

7、进一步的，所述高脂喂养的饲料组成包括脂肪、胆固醇和胆酸钠。

8、进一步的，所述脂肪40kcal％，胆固醇1.25％，胆酸钠0.5％。

9、进一步的，所述的构建方法还包括选取c57小鼠普食喂养，作为对比例。

10、进一步的，喂养预设时间为8-10周。

11、进一步的，所述应激刺激包括禁食24h、禁水24h、昼夜颠倒、鼠笼倾斜45°10h、潮湿垫料24h、束缚1h或恐惧刺激中至少一种。

12、进一步的，相邻两天不使用同一种应激刺激。

13、本发明的第二目的是提供上述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在研究双心疾病机理上的应用。

14、本发明的第三目的是提供上述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在筛选靶向治疗双心疾病的药物中的应用。

15、与现有技术比较，本发明提供的技术方案带来的有益效果是：

16、本研究中双心疾病模型构建过程与人类疾病形成相似，通过高脂饮食诱导apoe-/-小鼠形成as而后复合cums模拟自然发病过程。复合模型小鼠主动脉根部出现脂质沉积、管腔狭窄等as病理表现，探索能力下降、快感缺失等抑郁样行为，标志成功建立了as合并慢性应激的模型。另外本研究关注到了慢性应激对as状态下心肌损伤的影响，同时比较正常饮食与高脂饮食形成的as小鼠经历慢性应激后是否会造成不同程度的心肌损伤，as-r+cums、as-h+cums组均出现了不同程度的心肌损伤。as-r+cums、as-h+cums小鼠模型均可用于慢性应激对as小鼠心肌损伤的研究，apoe-/-小鼠高脂处理可能更快速获得程度较重的as病变，减少研究周期及成本。且其病变形成及加重过程模拟了as危险因素如胆固醇水平异常、肥胖、家族史和不健康饮食等条件。

1.一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述apoe-/-小鼠的体重为18-20g。

3.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高脂喂养的饲料组成包括脂肪、胆固醇和胆酸钠。

4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述脂肪40kcal％，胆固醇1.25％，胆酸钠0.5％。

5.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法还包括选取c57小鼠普食喂养，作为对比例。

6.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，喂养预设时间为8-10周。

7.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述应激刺激包括禁食24h、禁水24h、昼夜颠倒、鼠笼倾斜45°10h、潮湿垫料24h、束缚1h或恐惧刺激中至少一种。

8.如权利要求7所述的构建方法，其特征在于，相邻两天不使用同一种应激刺激。

9.如权利要求1-8中任一项所述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在研究双心疾病机理上的应用。

10.如权利要求1-8中任一项所述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在筛选靶向治疗双心疾病的药物中的应用。