一种双心疾病慢性应激合并AS心肌损伤动物模型的构建方法

本发明属于疾病动物模型构建方法,具体涉及一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法。
背景技术:
1、以动脉粥样硬化性心血管疾病(ascvd)为主导的脑血管疾病(cvd)是我国城乡居民的首要致死原因,占城乡居民死因构成比的40%以上。ascvd患者罹患抑郁症的风险是普通人群的三倍,且动脉粥样硬化(as)与抑郁症的共病率高达40%。而现有研究中,陈晨等人通过给雄性apoe-/-小鼠喂食高脂饲料同时cums 8周构建了动脉粥样硬化(as)合并抑郁的小鼠模型,以探究抑郁对as小鼠主动脉斑块发展及体内炎症水平的影响。而曹洪福等人的研究则进一步细分,以apoe-/-小鼠为对象,分别设置普通饮食加cums作为抑郁组、高脂饮食组为冠心病组、高脂饮食加cums作为冠心病合并抑郁组,对比分析小鼠主动脉中nlrp3炎症小体的变化及海马神经元的凋亡情况。目前,还未有模型能够模拟反映慢性应激加重动脉粥样硬化心肌损伤的。
技术实现思路
1、本发明的目的在于,针对现有技术的上述不足,提供了一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法,尤其是慢性应激加重动脉粥样硬化状态下心肌损伤,为双心疾病的发病机制、病理特征、治疗方法研究和开发提供新的动物模型。
2、为实现上述目的,本发明采用如下的技术方案:
3、本发明的第一目的是提供一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法,包括如下步骤:
4、s1、随机挑选apoe-/-小鼠高脂喂养,喂养预设时间后,进行动脉粥样硬化模型评估,确认apoe-/-小鼠的as造模成功;
5、s2、对步骤s1得到的患as疾病的apoe-/-小鼠施加不同的应激刺激,并于应激刺激实施的第0、2、4、6周周末进行旷场实验及糖水偏好实验,确认得到慢性应激合并as心肌损伤动物模型。
6、进一步的,所述apoe-/-小鼠的体重为18-20g。
7、进一步的,所述高脂喂养的饲料组成包括脂肪、胆固醇和胆酸钠。
8、进一步的,所述脂肪40kcal%,胆固醇1.25%,胆酸钠0.5%。
9、进一步的,所述的构建方法还包括选取c57小鼠普食喂养,作为对比例。
10、进一步的,喂养预设时间为8-10周。
11、进一步的,所述应激刺激包括禁食24h、禁水24h、昼夜颠倒、鼠笼倾斜45°10h、潮湿垫料24h、束缚1h或恐惧刺激中至少一种。
12、进一步的,相邻两天不使用同一种应激刺激。
13、本发明的第二目的是提供上述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在研究双心疾病机理上的应用。
14、本发明的第三目的是提供上述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在筛选靶向治疗双心疾病的药物中的应用。
15、与现有技术比较,本发明提供的技术方案带来的有益效果是:
16、本研究中双心疾病模型构建过程与人类疾病形成相似,通过高脂饮食诱导apoe-/-小鼠形成as而后复合cums模拟自然发病过程。复合模型小鼠主动脉根部出现脂质沉积、管腔狭窄等as病理表现,探索能力下降、快感缺失等抑郁样行为,标志成功建立了as合并慢性应激的模型。另外本研究关注到了慢性应激对as状态下心肌损伤的影响,同时比较正常饮食与高脂饮食形成的as小鼠经历慢性应激后是否会造成不同程度的心肌损伤,as-r+cums、as-h+cums组均出现了不同程度的心肌损伤。as-r+cums、as-h+cums小鼠模型均可用于慢性应激对as小鼠心肌损伤的研究,apoe-/-小鼠高脂处理可能更快速获得程度较重的as病变,减少研究周期及成本。且其病变形成及加重过程模拟了as危险因素如胆固醇水平异常、肥胖、家族史和不健康饮食等条件。
技术特征:
1.一种双心疾病慢性应激合并as心肌损伤动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述apoe-/-小鼠的体重为18-20g。
3.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述高脂喂养的饲料组成包括脂肪、胆固醇和胆酸钠。
4.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述脂肪40kcal%,胆固醇1.25%,胆酸钠0.5%。
5.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述的构建方法还包括选取c57小鼠普食喂养,作为对比例。
6.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,喂养预设时间为8-10周。
7.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述应激刺激包括禁食24h、禁水24h、昼夜颠倒、鼠笼倾斜45°10h、潮湿垫料24h、束缚1h或恐惧刺激中至少一种。
8.如权利要求7所述的构建方法,其特征在于,相邻两天不使用同一种应激刺激。
9.如权利要求1-8中任一项所述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在研究双心疾病机理上的应用。
10.如权利要求1-8中任一项所述的慢性应激合并as心肌损伤动物模型在筛选靶向治疗双心疾病的药物中的应用。
技术总结
本发明涉及疾病动物模型构建方法技术领域,具体公开了一种双心疾病慢性应激合并AS心肌损伤动物模型的构建方法。该构建方法包括随机挑选ApoE<supgt;‑/‑</supgt;小鼠高脂喂养,喂养预设时间后,进行AS模型评估,确认ApoE<supgt;‑/‑</supgt;小鼠的AS造模成功;对得到的患AS疾病的ApoE<supgt;‑/‑</supgt;小鼠施加不同的应激刺激,并于应激刺激实施的第0、2、4、6周周末进行旷场实验及糖水偏好实验,确认得到慢性应激合并动脉粥样硬化心肌损伤动物模型。造模后小鼠行为学指标提示活动水平及探索能力显著下降、快感缺失,组织病理学提示主动脉根部出现脂质沉积等AS病变,心功能下降,心肌损伤标志物显著升高,表明慢性应激加重AS下心肌损伤动物模型建立成功。
技术研发人员:于睿,段盈竹,于游,倪萍,杜卓铭,矫沐其,张学亮,张欢,张颖,赵宏月
受保护的技术使用者:辽宁中医药大学
技术研发日:
技术公布日:2024/11/26
技术研发人员:于睿,段盈竹,于游,倪萍,杜卓铭,矫沐其,张学亮,张欢,张颖,赵宏月
技术所有人:辽宁中医药大学
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