抗体制剂的制作方法

本发明涉及一种抗血管生成素-2(ang-2)-2和人血管内皮生长因子(vegf,vegf-a)的双特异性抗体(双特异性抗vegf/ang2抗体)的液体药物制剂以及一种制备和使用该制剂的方法。

背景技术：

1、抗血管生成素-2(ang-2)-2和人血管内皮生长因子(vegf,vegf-a)的双特异性抗体(双特异性抗vegf/ang2抗体)具有治疗意义，特别是作为治疗和预防性治疗血管疾病(眼部血管疾病)的药物。双特异性抗vegf/ang2抗体描述于例如wo2010040508、wo2011/117329或wo2014/009465。这些抗体抑制vegf与vegf受体的结合，同时使ang-2与tie2结合。

2、抗体分子作为蛋白质药物组的一部分，非常容易受到物理和化学降解的影响。化学降解包括涉及通过键形成或裂解来修饰蛋白质以得到新化学实体的任何过程。已知多种化学反应影响蛋白质。这些反应可能涉及水解(包括肽键的裂解)以及脱酰胺、异构化、氧化和分解。物理降解是指较高阶结构的变化，并且包括变性、表面吸附、聚集和沉淀。蛋白质稳定性受蛋白质本身的特征(例如氨基酸序列、糖基化模式)以及外部影响因素(诸如温度、溶剂ph、赋形剂、界面或剪切速率)的影响。因此，确定最佳制剂条件对于保护蛋白质在生产、储存和施用过程中免于发生降解反应很重要。(manning,m.c.等人(1989),"stability ofproteinpharmaceuticals",pharm res 6(11),903-918；zheng,j.y.,janis,l.j.(2005),"influence of ph,buffer species,and storage temperature onphysicochemicalstability of a humanized monoclonal antibody la298",int.j.pharmaceutics 308,46-51)。当制剂中应包含高浓度抗体时，特别难以获得稳定的治疗抗体液体制剂。

3、因此，本发明的目的是提供一种双特异性vegf/ang2抗体的液体(特别是高浓度)制剂，该制剂包含尽可能少的必需赋形剂，能够实现所需的给药，并且方便通过细针将双特异性抗体经玻璃体内施用施用于患者。

技术实现思路

1、本发明涉及一种双特异性抗vegf/ang2抗体的液体药物制剂以及一种制备和使用该制剂的方法。特别地，本发明的药物制剂用于经玻璃体内施用以治疗眼科疾病(如amd和dme)。

2、在一个方面，本发明涉及一种液体药物制剂，该液体药物制剂包含：

3、-20mg/ml至150mg/ml双特异性抗vegf/ang2抗体，该抗体包含人igg1亚类的重链恒定区

4、-15mm至35mm氯化钠

5、-15mm至25mm组氨酸醋酸盐缓冲剂

6、其ph值为5.5±0.5；其中

7、双特异性抗vegf/ang2抗体为二价的，并且包含与人vegf特异性结合的第一抗原结合位点和与人ang-2特异性结合的第二抗原结合位点，其中

8、i)与vegf特异性结合的所述第一抗原结合位点在重链可变结构域中包含seq idno:1的cdr3h区、seq id no:2的cdr2h区和seq id no:3的cdr1h区，并且在轻链可变结构域中包含seq id no:4的cdr3l区、seq id no:5的cdr2l区和seq id no:6的cdr1l区；并且

9、ii)与ang-2特异性结合的所述第二抗原结合位点在重链可变结构域中包含seqid no:9的cdr3h区、seq id no:10的cdr2h区和seq id no:11的cdr1h区，并且在轻链可变结构域中包含seq id no:12的cdr3l区、seq idno:13的cdr2l区和seq id no:14的cdr1l区，并且其中

10、iii)双特异性抗体包含人igg1亚类的重链恒定区，该重链恒定区包含突变i253a、h310a和h435a以及突变l234a、

11、l235a和p329g(根据kabat eu索引编号)。

12、在一个实施例中，该双特异性抗vegf/ang2抗体为二价的，并且包含seq id no:17的氨基酸序列、seq id no:18的氨基酸序列、seq idno:19的氨基酸序列和seq id no:20的氨基酸序列。

13、在一个实施例中，该双特异性抗vegf/ang2抗体为法立昔单抗(faricimab)。

14、在一个实施例中，该制剂进一步包含

15、-1mm至20mm至少一种稳定剂。

16、在一个实施例中，该制剂进一步包含

17、-7.0mm±2.0mm甲硫氨酸。

18、在一个实施例中，该制剂进一步包含

19、-0.01％(w/v)至0.07％(w/v)表面活性剂。

20、在一个实施例中，该制剂进一步包含

21、-0.04％(w/v)±0.02％(w/v)聚山梨酯20。

22、在一个实施例中，该制剂进一步包含

23、-50mm至250mm张度剂。

24、在一个实施例中，该制剂进一步包含

25、-160mm±24mm蔗糖。

26、在一个实施例中，该制剂基本上不含可见颗粒。

27、在一个实施例中，该制剂为稳定制剂。

28、在一个实施例中，该制剂的渗透压为300mosm/kg±100mosm/kg。

29、在一个实施例中，该制剂用于玻璃体内施用。

30、在一个方面，该制剂用于治疗眼部血管疾病。

31、在一个实施例中，该眼部血管疾病选自由以下项组成的组：糖尿病性视网膜病变(dr)、糖尿病性黄斑水肿(dme)、视网膜静脉阻塞(rvo)、视网膜中央静脉阻塞(crvo)、黄斑变性、湿性年龄相关性黄斑变性(湿性amd)、早产儿视网膜病变(rop)、新生血管性青光眼、色素性视网膜炎(rp)、视网膜血管瘤样增生、黄斑毛细血管扩张、缺血性视网膜病变、虹膜新生血管、眼内新生血管、角膜新生血管、视网膜新生血管、脉络膜新生血管和视网膜变性，特别地选自由以下项组成的组糖尿病性视网膜病变(dr)、糖尿病性黄斑水肿(dme)、视网膜静脉阻塞(rvo)、视网膜中央静脉阻塞(crvo)、湿性年龄相关性黄斑变性(湿性amd)。

32、本发明的一个方面提供了一种制备根据本发明所述的药物制剂的方法。

33、本发明的一个方面提供了一种包含根据本发明所述的药物制剂的小瓶。

34、本发明的一个方面提供了一种包含根据本发明所述的药物制剂的预充式注射器。

35、本发明的一个方面提供了一种根据本发明所述的冻干形式的液体药物制剂。

36、本发明提供了一种双特异性抗vegf/ang2抗体(包含igg1恒定区)的液体药物制剂，其具有可用于眼科使用和玻璃体内应用的有价值的性质：该制剂具有低粘度和低浊度(即使在约120mg/l的高浓度下)，该制剂稳定并且等渗。这尤其通过将20mg/ml至150mg/ml(特别是100mg/ml至140mg/ml)如本文所述的包含人igg1亚类的重链恒定区的双特异性抗vegf/ang2抗体与15mm至35mm氯化钠和15mm至25mm组氨酸缓冲剂(ph值为5.5±0.5)组合来实现。