一种含贻贝粘蛋白修复凝胶及其制备方法和应用与流程

本发明涉及修复凝胶的，具体涉及一种含贻贝粘蛋白修复凝胶及其制备方法和应用。

背景技术：

1、贻贝粘蛋白是一种由贻贝足丝腺分泌的蛋白质，具有极强的粘附性，能够在海水中牢固地粘附于各种表面，并且能够耐受长时间的海水冲刷。这种蛋白质的主要成分是赖氨酸和多巴基团，具有快速吸引细胞贴壁和爬行的能力，以及形成非连续微观生物支架的特性。

2、直接从贻贝提取的贻贝粘蛋白(map)可能粘合强度较弱，限制了其在临床的推广应用。贻贝粘蛋白在溶液中为开放的无定形结构，dopa的存在使蛋白易于氧化，尤其在高ph值下会加速氧化。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种含贻贝粘蛋白修复凝胶及其制备方法和应用，其具有良好的粘附性和抗菌性，而且能在湿润环境中保持一定的机械强度，加速肌肤表面受损部位的修复和愈合。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

3、第一方面，本发明提供了一种含贻贝粘蛋白修复凝胶，包括以下按重量计的原料：

4、皮肤调理剂30～45份、增稠剂2～5份、中和剂0.2～0.5份、羧甲基壳聚糖1～5份、贻贝粘蛋白0.5～1份、氧化透明质酸1～5份、钙盐和丝素蛋白的复合溶液10～12份和水40～60份。

5、本发明的修复凝胶主要利用氧化透明质酸和羧甲基壳聚糖的席夫碱反应制备了一种安全、无毒的水凝胶。氧化透明质酸中醛基与壳聚糖中的氨基通过席夫碱反应形成亚胺(c＝n)，然后形成化学交联水凝胶，双交联凝胶明显提高修复凝胶的粘附性能和力学性能，再辅以其他皮肤调理剂以进一步提高凝胶的修复能力。丝素蛋白在凝胶中可以形成稳定的三维网络结构，增强凝胶的孔隙性和透气性，有利于细胞的渗透和营养物质的交换。而且其还具有良好的保湿性能，能够吸附和保持水分，提高凝胶的保湿效果，钙盐和丝素蛋白的复合溶液是将钙离子作为金属螯合物以提高丝素蛋白中随机线圈链的交联程度，从而提高了凝胶的内聚力，所以还能进一步提高凝胶的机械性能。凝胶中的主要成分是贻贝粘蛋白，通过将贻贝粘蛋白加入到凝胶中，可以显著提高凝胶的粘附强度，使其在湿润环境中更稳定。贻贝粘蛋白的生物相容性使其成为细胞培养基质的理想成分，有助于细胞在凝胶中的粘附和生长。而且贻贝粘蛋白的多巴基团具有抗氧化和抗炎特性，有助于减少炎症和氧化应激。

6、另外，因为羧甲基壳聚糖与氧化透明质酸形成了席夫碱化合物，其具有很好的抗菌和抗真菌效果。例如，它们对金黄色葡萄球菌、革兰氏阳性菌、枯草杆菌、大肠杆菌等细菌具有显著的抑制作用。

7、优选地，所述皮肤调理剂包括苦参根提取物、蛇床子提取物、黄柏提取物、对叶百部根提取物、桃柁酚、可溶性胶原、神经酰胺、β-葡聚糖、四氢胡椒碱中的至少一种。

8、苦参提取物含有多种生物碱，对多种生物和真菌具有抑制作用，因此具有抑菌和抗炎的效果，在纤维芽细胞等中培养，能有效促进胶原蛋白的生成，能起到修复的效果。

9、蛇床子提取物具有显著的抗炎效果，能够抑制炎症因子的形成，减少皮肤红肿和疼痛。其主要活性成分蛇床子素(osthole)在抗炎方面表现出色。

10、黄柏提取物含有生物碱如盐酸小檗碱、药根碱、黄柏碱等，这些成分具有显著的抗菌效果。研究表明，黄柏提取物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希氏菌有抑制作用，能够减弱金黄色葡萄球菌残余株的致病力。

11、对叶百部作为一种中药材，其干燥块根被录入《药典》，具有性味甘、苦、微温、归肺经的特点。百部根提取物是众多止咳、皮肤外用杀虫配方制剂药的主要组分，外用于皮肤可以发挥杀虫、止痒、灭虱、湿疹阴痒等作用。这些作用使得对叶百部根提取物在中医药领域中有着广泛的应用，尤其是在治疗皮肤疾病方面，如湿疹、阴痒等，显示出其独特的药用价值。

12、桃柁酚是一种高效的抗菌剂，对革兰氏阳性菌如链球菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌等具有较好的抗菌作用。其抗菌活性在抗细菌和抗真菌方面均表现出色，能够有效抑制金葡菌、肺炎杆菌、粪肠球菌以及肺炎双球菌等。

13、所以本发明中采用苦参提取物、黄柏提取物、蛇床子提取物、对叶百部根提取物和桃柁酚等成分协同提高凝胶的抗炎抑菌效果。

14、可溶性胶原由于其特殊的分子结构，胶原蛋白的分子量相对较小，这使得它能够渗透到皮肤的角质层，所以用于提高凝胶的保湿性，使得皮肤使用后能长时间保持湿润状态。

15、神经酰胺是一种脂质物质，它和构成皮肤角质层的物质结构相近，能很快渗透进皮肤，帮助皮肤天然保护层的更新，能促进自然水合作用的平衡，和角质层中的水结合，形成一种网状结构，锁住水分。对肌肤保湿修护有良好作用。

16、β-葡聚糖是一种具有生物活性的大分子生物多糖，具有良好的保湿效果。它能够减少皮肤表面水分蒸发，使得水分从基底组织扩散到角质层，诱导角质层进一步水化，细胞的增殖用。而且还能够促进格朗罕氏细胞的增殖，在机体免疫和细胞修复过程中发挥重要作用。临床研究表明，β-葡聚糖具有显著的消炎、抗过敏活性，能够提高受损皮肤的复原功能，加速皮肤伤口的愈合。

17、四氢胡椒碱是一种强效的天然促渗透剂，能够增加脂质双层的流动性，促进药物分子和活性物分子扩散通过脂质双层的碳氢化合物部位，从而增加凝胶中的营养物质与细胞膜的亲和能力。

18、更优选地，所述皮肤调理剂包括以下按重量份的原料：苦参根提取物1～4份、蛇床子提取物1～2份、黄柏提取物1～2份、对叶百部根提取物1～2份、桃柁酚1～2份、可溶性胶原10～20份、神经酰胺np2～5份、β-葡聚糖5～10份、四氢胡椒碱0.5～1份。

19、优选地，所述增稠剂为卡波姆。

20、优选地，所述中和剂为三乙醇胺。

21、优选地，所述氧化透明质酸的制备方法，包括以下步骤：

22、将透明质酸溶于水中制成溶液，然后加入高碘酸钠进行氧化反应，再加入乙二醇终止反应，最后经透析、冷冻干燥后，得到所述氧化透明质酸。

23、优选地，高碘酸钠和透明质酸的质量比为(0.5～0.7)：1，其质量比的范围决定了透明质酸的氧化程度，氧化程度越高，形成的醛基越多，可以与更多的氨基或其他反应基团形成席夫碱等共价键，从而增加交联点的数量。这会增强凝胶的机械强度和稳定性。若高碘酸钠的加入量过低，即氧化程度较低，会导致较大的孔隙和较弱的交联网络，降低凝胶的机械强度。若高碘酸钠的加入量过高，即氧化透明质酸的氧化程度过高，其会影响凝胶的自愈能力。凝胶的自愈能力依赖于其内部的动态可逆共价键，氧化程度过高会破坏这些键的形成和稳定性，导致凝胶的自愈能力降低。

24、优选地，氧化反应的温度为25～30℃，时间为10～12h。

25、优选地，所述钙盐和丝素蛋白的复合溶液的制备方法，包括以下步骤：

26、将丝素蛋白和钙盐加入甲酸溶液中，搅拌均匀后得到所述钙盐和丝素蛋白的复合溶液。

27、优选地，所述钙盐为氯化钙。优选地，所述钙盐和丝素蛋白的复合溶液中钙盐的质量浓度凝胶％。若钙盐浓度低于5％，导致凝胶凝胶内部分子之间作用力不足，粘度有所降低；而钙盐浓度高于7％，凝胶内部的网状结构会逐渐破坏，导致粘度的明显降低。所以在钙盐的优选浓度范围内，有利于促进凝胶内部的网络互相连结、缠绕，以提高分子之间的作用力，从而使得凝胶表现出较高的粘度。

28、优选地，所述钙盐和丝素蛋白的复合溶液中丝素蛋白的质量浓度为6～10％。

29、优选地，所述钙盐和丝素蛋白的复合溶液中甲酸的质量浓度为80～85％。

30、第二方面，本发明提供所述的含贻贝粘蛋白修复凝胶的制备方法，包括以下步骤：

31、先将皮肤调理剂、贻贝粘蛋白、钙盐和丝素蛋白的复合溶液和水混合，再加入羧甲基壳聚糖、氧化透明质酸，混合均匀后，再加入增稠剂和中和剂，搅拌均匀后，得到所述含贻贝粘蛋白修复凝胶。

32、第三方面，本发明提供一种含贻贝粘蛋白修复凝胶在制备修复型化妆品中的应用。如精华、水乳、敷料等。

33、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

34、本发明的修复凝胶主要利用氧化透明质酸和羧甲基壳聚糖的席夫碱反应制备了一种安全、无毒的水凝胶，还能明显提高修复凝胶的粘附性能和力学性能，再辅以其他皮肤调理剂以进一步提高凝胶的修复能力。而钙盐和丝素蛋白是将钙离子作为金属螯合物以提高丝素蛋白中随机线圈链的交联程度，从而提高了凝胶的内聚力，所以还能进一步提高凝胶的机械性能。