PLEKHH2在肺动脉高压诊断和治疗方面的应用
背景技术：
：：1、肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，pah)是一类以肺动脉压力升高、肺血管阻力进行性增大为主要特征的恶性肺血管疾病，往往导致严重右心功能衰竭甚至死亡。特发性肺动脉高压(idiopathic pulmonary arterial hypertension，ipah)和遗传性肺动脉高压(heritable pulmonary arterial hypertension，hpah)是最主要的肺动脉高压类型，在第一大类肺动脉高压中占比37％-49％。ipah/hpah属于罕见病，发病率为5-10/百万人口。ipah/hpah在儿童到成人各年龄段均可发病。ipah/hpah目前面临的最主要的临床问题是缺乏真正有效的治疗药物。现有的肺动脉高压治疗药物均为扩张肺血管的“对症治疗”，仅能延缓疾病进展，尚无药物可有效逆转患者肺血管病理重构。ipah/hpah的重大疾病负担已经引起国家层面的高度重视，2018年国家卫生健康委员会等五部委将ipah/hpah列入《中国第一批罕见病目录》，明确其为国家重要罕见病，因此，进一步加快肺动脉高压相关的基础研究、发现新药靶点刻不容缓。2、ipah/hpah是单基因常染色体显性遗传病，具有明显的家族遗传性和聚集性。截至2022年12月，全球共发现21个肺动脉高压遗传相关基因(其中bmp9、ptgis两个基因由本发明的发明人课题组原创报道)，总体上可以解释50-70％ hpah以及20-40％ ipah患者病因。遗传相关基因既是认识肺动脉高压患者病因的突破口，也是揭开肺动脉高压病理机制、研发新药的关键“钥匙”。目前已知的肺动脉高压致病基因大多数(bmpr2、alk1、eng、cav1、sox17、kdr等)都在肺血管内皮细胞高表达，提示肺血管内皮细胞损伤是肺动脉高压发病的源头。其中，以肺动脉高压致病基因bmpr2、sox17为靶点，上调这些基因的表达或提高其活性可以保护肺动脉内皮细胞，抑制增殖，逆转间质化转变，在动物模型上表现出较好的预防或治疗肺动脉高压的效果，部分药物已经进入临床试验，是目前全球肺动脉高压药物研发的热点。3、因此，发现肺动脉高压遗传相关基因具有双重临床意义：一方面，致病突变是ipah/hpah肺动脉高压的真正病因，对于临床疾病诊断至关重要；另一方面，如果明确致病基因具有保护作用，致病基因将成为新的潜在靶点，为临床治疗提供新的可能。有鉴于此，本发明采用“遗传家系发现--散发患者验证”的策略首次发现plekhh2是一个全新的肺动脉高压遗传相关基因，通过细胞实验表明plekhh2基因对肺血管内皮细胞具有重要的保护作用，通过动物实验证实高表达plekhh2可有效预防、治疗肺动脉高压。迄今为止，尚未见plekhh2在诊断和/或治疗肺动脉高压中的应用的相关研究或报道。技术实现思路1、针对现有技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供plekhh2在肺动脉高压诊断和治疗方面的应用。2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：3、本发明的第一方面提供了抑制hic-5与smad7结合的试剂和/或抑制hic-5的试剂在制备用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物中的应用。4、进一步，所述试剂包括针对hic-5与smad7结合位点和/或针对hic-5的小分子化合物、多肽、肽模拟物、核酸分子、蛋白质、抗体、抗体模拟物、融合蛋白、蛋白类似物、基因递送载体、蛋白递送载体、适配体、shrna、sirna、mirna、反义核酸、crispr基因编辑试剂和/或其任意组合；5、可选地，所述hic-5与smad7结合位点为hic-5的lim3结构域；6、可选地，所述试剂能够与smad7竞争性结合hic-5的lim3结构域；7、可选地，所述试剂包括plekhh2和/或plekhh2促进剂；8、可选地，所述plekhh2和/或plekhh2促进剂包括plekhh2基因、plekhh2 mrna、plekhh2cdna、plekhh2蛋白、plekhh2蛋白的肽段、plekhh2蛋白的类似物、前述任一种的活性片段、表达plekhh2的载体、携带plekhh2基因的纳米颗粒、携带plekhh2基因的病毒载体、包裹plekhh2基因或蛋白的peg修饰蛋白、包裹plekhh2基因或蛋白的蛋白微球、包裹plekhh2基因或蛋白的脂质体、包裹plekhh2基因或蛋白的细胞外囊泡和/或其任意组合；9、可选地，所述plekhh2和/或plekhh2促进剂通过抑制smad2/3过度磷酸化预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压。10、在本发明中，本发明首次通过实验验证了抑制hic-5与smad7结合和/或抑制hic-5对预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的有效性。11、本发明的第二方面提供了plekhh2和/或plekhh2促进剂在制备用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物中的应用。12、进一步，所述plekhh2包括plekhh2基因、plekhh2 mrna、plekhh2 cdna、plekhh2蛋白、前述任一种的活性片段和/或其任意组合；13、可选地，所述plekhh2促进剂包括提高plekhh2水平的物质、增强plekhh2活性的物质、延缓plekhh2代谢的物质和/或其任意组合；14、可选地，所述plekhh2促进剂包括天然纯化物质、经修饰的天然纯化物质、半合成物质和/或化学合成物质；15、可选地，所述plekhh2促进剂包括plekhh2蛋白、plekhh2蛋白的肽段、plekhh2蛋白的类似物、表达plekhh2的载体、携带plekhh2基因的纳米颗粒、携带plekhh2基因的病毒载体、包裹plekhh2基因或蛋白的peg修饰蛋白、包裹plekhh2基因或蛋白的蛋白微球、包裹plekhh2基因或蛋白的脂质体、包裹plekhh2基因或蛋白的细胞外囊泡和/或其任意组合。16、可选地，所述plekhh2和/或plekhh2促进剂能够降低右心室收缩压、减轻右心室肥厚、增加三尖瓣环收缩期位移、减轻肺动脉血管重构。17、在一些实施方案中，所述plekhh2包括plekhh2基因和plekhh2蛋白质。plekhh2基因在研究对象体内经转录翻译为plekhh2蛋白产物。在优选的实施方案中，所述plekhh2基因的gene id为130271，全称为pleckstrin homology,myth4 and ferm domaincontaining h2[homo sapiens(human)]。所述hic-5又称为tgfb1i1，其在ncbi(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中对应的gene id为7041。所述smad7在ncbi中对应的gene id为4092。18、在一些实施方案中，所述plekhh2来自于哺乳动物，包括但不限于：人、非人灵长类动物(例如猩猩、猿、猴)、啮齿动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠)、宠物(例如猫、狗)、家畜(例如马、牛、羊、猪、兔)，在优选的实施方案中，所述plekhh2来自于人。19、在一些实施方案中，所述plekhh2具有本领域已知的序列或为其衍生分子。在一些实施方案中，所述plekhh2为包括如下序列的分子：(a)具有诸如gene id:130271(人)、geneid:213556(家鼠)、gene id:313866(挪威鼠)、gene id:713488(恒河猴)、gene id:100299044(牛)等所示序列的plekhh2分子；(b)在严格条件下与(a)限定的序列杂交的分子；(c)与(a)或(b)中所示分子的序列具有70％以上(例如75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％、99.5％以上，或其间的任何数值或数值范围)的序列同源性的分子，例如经密码子优化获得的plekhh2分子。20、在一些实施方案中，所述plekhh2促进剂是指能够提高plekhh2水平、增强plekhh2活性和/或延缓plekhh2代谢的物质，包括但不限于：小分子化合物、表达plekhh2的载体、携带plekhh2基因的纳米颗粒、携带plekhh2基因的病毒载体、包裹plekhh2基因或蛋白的peg修饰蛋白、包裹plekhh2基因或蛋白的蛋白微球、包裹plekhh2基因或蛋白的脂质体、包裹plekhh2基因或蛋白的细胞外囊泡和/或其任意组合。21、在一些实施方案中，所述载体包括但不限于：慢病毒载体、逆转录病毒载体、痘病毒载体、单纯疱疹病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、dna质粒载体、结合dna质粒的脂质体、结合dna质粒的分子耦联体和/或结合dna质粒的多聚物，只要能够用于递送本发明所述的目的基因plekhh2的载体均在本发明的保护范围内，在优选的实施方案中，所述载体为腺病毒载体。22、本发明的第三方面提供了如下任一种产品：23、(1)一种用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物组合物，所述药物组合物包含本发明第一方面中所述的抑制hic-5与smad7结合的试剂和/或抑制hic-5的试剂、和/或本发明第二方面中所述的plekhh2和/或plekhh2促进剂；24、(2)一种用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物制剂，所述药物制剂包含所述药物组合物。25、进一步，所述药物组合物还可包含其他用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物；可选地，所述药物包括钙通道阻滞剂、前列环素类药物、内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶-5抑制剂和/或鸟苷酸环化酶激动剂；可选地，所述药物组合物还可包含药学上可接受的载体和/或辅料；26、可选地，所述药物制剂的剂型包括注射剂、冻干粉剂、溶液剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、混悬剂、口服液、控释剂型、纳米晶体制剂、微乳剂和/或固体分散体。27、在一些实施方案中，所述药物组合物中包含的其他用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物包括但不限于：钙通道阻滞剂、前列环素类药物、内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶-5抑制剂和/或鸟苷酸环化酶激动剂，只要能够用于肺动脉高压的预防、治疗、缓解和/或改善的药物均在本发明的保护范围内。在一些实施方案中，所述钙通道阻滞剂包括但不限于：地尔硫卓、维拉帕米、硝苯地平、氨氯地平、尼群地平、非洛地平、乐卡地平；所述前列环素类药物包括但不限于：利奥前列腺素、阿巴前列素、地诺前列酮、喜克溃、恩前列素、曲莫前列素、罗沙前列醇；所述内皮素受体拮抗剂包括但不限于：波生坦、安立生坦、马昔腾坦；所述磷酸二酯酶-5抑制剂包括但不限于：他达拉非、伐地那非、西地那非；所述鸟苷酸环化酶激动剂包括但不限于：利奥西胍、贝前列素、vericiguat、利那洛肽。28、在一些实施方案中，所述药学上可接受的载体和/或辅料的具体示例性例子包括但不限于：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素；西黄蓍胶粉末；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，如润湿剂，如月桂基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐溶液；和磷酸盐缓冲液等。29、在一些实施方案中，适合的药学上可接受的载体和/或辅料在remington'spharmaceutical sciences(19thed.,1995)中有详细的记载，这些物质根据需要用于帮助配方的稳定性或有助于提高活性或它的生物有效性或在口服的情况下产生可接受的口感或气味，在这种药物组合物中可以使用的制剂可以是其原始化合物本身的形式，或任选地使用其药物学可接受的盐的形式。如此配制的药物组合物根据需要可选择本领域技术人员已知的任何适当的方式把药物进行给药，使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明所述的药物组合物施用于人。30、在一些实施方案中，本发明所述的药物组合物的适合的给药剂量根据制剂化方法、给药方式、患者的年龄、体重、性别、病态、饮食、给药时间、给药途径、排泄速度及反应灵敏性之类的因素而可以进行多种处方，熟练的医生通常能够容易地决定处方及处方对所希望的预防和/或治疗有效的给药剂量。31、本发明的第四方面提供了如下任一方面应用：32、(1)hic-5的lim3结构域在筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物中的应用；33、(2)plekhh2和/或hic-5在筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物中的应用；34、(3)hic-5和/或smad7在筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物中的应用；35、(4)smad7在制备用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的药物中的应用；36、(5)检测样本中plekhh2表达水平的试剂在制备用于诊断和/或辅助诊断肺动脉高压的产品中的应用。37、进一步，所述试剂包括检测样本中plekhh2 mrna表达水平的试剂、检测样本中plekhh2蛋白表达水平的试剂；可选地，所述检测样本中plekhh2 mrna表达水平的试剂包括特异性扩增plekhh2的引物和/或特异性识别plekhh2的探针；可选地，所述检测样本中plekhh2蛋白表达水平的试剂包括特异性结合plekhh2编码的蛋白的结合剂；可选地，所述结合剂包括特异性结合plekhh2编码的蛋白的抗体、抗体功能片段、凝集剂、受体和/或偶联抗体。38、在一些实施方案中，所述样本是指获自或衍生自目标受试者的组合物，其包含有待例如基于物理、生物化学、化学和/或生理学特征表征和/或鉴定的细胞实体和/或其他分子实体。该样本可以获自受试者的血液和生物来源的其他流体样本及组织样本，如活检组织样本或从其衍生的组织培养物或细胞。组织样本的来源可以是实体组织，如来自新鲜、冷冻和/或保藏的器官或组织样本、活检组织或吸出物；血液或任意血液组分；体液；来自个体妊娠或发育的任何时间的细胞；或血浆。术语样本包括在其获得后以任何方式处理过的生物样本，如经试剂处理、稳定化、或针对某些成分(如蛋白质或多核苷酸)富集、或包埋在用于切片目的的半固体或固体基质中。本发明中所述的样本包括但不限于血液、组织、血液来源的细胞、血清、血浆、淋巴液、滑膜液、细胞提取物及其组合，在优选的实施方案中，所述样本选自于受试者的血液或组织。39、在一些实施方案中，所述特异性结合plekhh2编码的蛋白的结合剂包括与plekhh2蛋白特异性结合的抗体、抗体功能片段、凝集剂、受体、偶联抗体肽、适配体和/或化合物。40、在一些实施方案中，所述试剂是通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术、蛋白免疫技术检测样本中plekhh2的表达水平。41、进一步，采用如下第五方面中所述的方法进行候选药物的筛选。42、本发明的第五方面提供了如下任一种方法：43、(1)一种筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物的方法，所述方法包括如下步骤：44、(a)用待测物质处理表达或含有plekhh2基因的体系；45、(b)检测所述体系中plekhh2基因的表达；46、(c)选择可升高plekhh2基因表达水平的测试物质为候选药物；47、在一些实施方案中，任何可能对肺动脉高压具有预防、治疗、缓解和/或改善作用的物质均为待测物质。进一步地，步骤(c)中所述选择的测试物质为与在该测试物质不存在时检测到的表达水平相比显著升高plekhh2表达水平的测试物质；48、(2)一种基于hic-5的lim3结构域筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物的方法，所述方法包括如下步骤：筛选能够与hic-5的lim3结构域结合的试剂为候选药物；49、(3)一种基于plekhh2和/或hic-5筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物的方法，所述方法包括如下步骤：模拟hic-5与plekhh2结合位点，设计和/或筛选能够与所述结合位点结合的试剂为候选药物；50、(4)一种基于hic-5和/或smad7筛选用于预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的候选药物的方法，所述方法包括如下步骤：模拟hic-5与smad7结合位点，设计和/或筛选能够与所述结合位点结合的试剂为候选药物；51、可选地，所述体系包括细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系和/或动物体系；可选地，所述待测物质包括提高plekhh2水平的物质、增强plekhh2活性的物质、延缓plekhh2代谢的物质和/或其任意组合；可选地，所述试剂包括针对hic-5与smad7结合位点和/或针对hic-5的小分子化合物、多肽、肽模拟物、核酸分子、蛋白质、抗体、抗体模拟物、融合蛋白、蛋白类似物、基因递送载体、蛋白递送载体、适配体、shrna、sirna、mirna、反义核酸、crispr基因编辑试剂和/或其任意组合。52、本发明的第六方面提供了如下任一种产品：53、(1)一种用于诊断和/或辅助诊断肺动脉高压的产品，所述产品包含本发明第四方面中所述的试剂；54、(2)一种肺动脉高压诊断和/或辅助诊断的系统/装置，所述系统/装置包括处理器、输入模块、输出模块；55、其中，处理器用于对输入的信息采用生物信息学方法进行逻辑运算；输入模块用于输入受试者样本中plekhh2的表达水平，包含指令的计算机可读介质，所述指令在由所述处理器执行时在plekhh2的输入表达水平上执行算法；输出模块用于输出受试者是否患有肺动脉高压或者患有肺动脉高压的风险；56、可选地，所述产品还包含通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术和/或蛋白免疫技术检测样本中plekhh2表达水平的试剂；57、可选地，所述产品包括试剂盒、芯片和/或试纸条。58、进一步，所述试剂盒包括rt-pcr试剂盒、dna芯片试剂盒、elisa试剂盒、蛋白芯片试剂盒、快速检测试剂盒或mrm(多反应监测)试剂盒；在一些实施方案中，所述试剂盒可进一步包含反转录聚合酶链式反应所必需的元件。rt-pcr试剂盒包含一对特异性针对编码标记物蛋白的基因的引物。各引物是具有特异性针对所述基因的核酸序列的核苷酸，其长度可为约7至50bp，更特别为约10-39bp。此外，所述试剂盒可进一步包含特异性针对对照基因的核酸序列的引物。在一些实施方案中，所述rt-pcr试剂盒还可包含测试管或合适的器皿、反应缓冲液(不同ph值和镁浓度)、脱氧核苷酸(dntp)、酶(例如taq聚合酶和反转录酶)、脱氧核糖核酸酶抑制剂、核糖核酸酶抑制剂、depc-水和无菌水。在一些实施方案中，所述试剂盒可包含用于操作dna芯片所必需的元件。所述dna芯片试剂盒可包含与基因或cdna或相当于其片段的寡核苷酸结合的底物、及用于构建荧光标记的探针的试剂、药剂和酶。此外，所述底物可包含对照基因或cdna或相当于其片段的寡核苷酸。在一些实施方案中，本发明公开的试剂盒可包含用于进行elisa所必需的元件。所述elisa试剂盒可包含特异性针对蛋白(本发明所述的生物标志物plekhh2蛋白)的抗体。所述抗体具有针对标记物蛋白的高选择性和亲合力，与其他蛋白无交叉反应性，并且可以是单克隆抗体、多克隆抗体或重组抗体。此外，所述elisa试剂盒可包含特异性针对对照蛋白的抗体。此外，所述elisa试剂盒可进一步包含能够检测被结合的抗体的试剂，例如，标记的第二抗体、发色团、酶(例如与抗体缀合)、及其底物或能够结合所述抗体的物质。59、此外，本发明还提供了一种预防、治疗、缓解和/或改善肺动脉高压的方法。所述方法包括如下步骤：给有需要的受试者施用有效量的本发明如前所述的抑制hic-5与smad7结合的试剂和/或抑制hic-5的试剂、plekhh2和/或plekhh2促进剂、药物组合物和/或药物制剂。60、此外，本发明还提供了一种诊断和/或辅助诊断肺动脉高压的方法。所述方法包括如下步骤：检测受试者来源的样本中plekhh2的表达水平，若与正常人相比，受试者来源的样本中plekhh2的表达水平显著降低，则该受试者被诊断为肺动脉高压患者。61、在一些实施方案中，所述受试者是指任何动物，还指人类和非人类的动物。术语非人类的动物包括所有脊椎动物，例如，哺乳动物，如非人灵长类动物(特别是高等灵长类动物)、绵羊、狗、啮齿类动物(如小鼠或大鼠)、豚鼠、山羊、猪、猫、兔、牛、和任何家畜或宠物；以及非哺乳动物，如鸡，两栖类，爬行动物等，在本发明的具体实施方式中，所述受试者优选为人。62、除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。为了促进对本发明的理解，此处对本发明中涉及到的如下术语进行解释：63、在本文中使用，术语“包括”或“包含”，是指包括所陈述的元件或组成部分中的任意一种或多种，而并未排除其它元件或其它组成部分。64、在本文中使用，术语“表达水平”同“水平”，是指本发明中所述生物标志物plekhh2的绝对量或相对量，可以通过多种技术确定本发明中所述生物标志物plekhh2的表达水平，特别地，可以通过使用本领域技术人员熟知的方法对本发明中所述生物标志物plekhh2的绝对量或相对量进行检测。65、在本文中使用，术语“引物”，是指能够形成与模板链互补的碱基对(basepair)，并且起到用于复制模板链的起始点作用的7-50个核酸序列。引物通常合成而得，但也可以使用自然生成的核酸。引物的序列并不一定需要与模板的序列完全相同，只要充分互补而能够与模板杂交即可。可以混入不改变引物的基本性质的追加特征。作为可以混入的追加特征的例子，有甲基化、带帽、一个以上的核酸被同系物取代和核酸间的修饰，但不限于此。66、在本文中使用，术语“探针”，是指短至几个到长达数百碱基的核酸片段，例如rna或dna，所述核酸片段可以与mrna建立特异性结合并且可以因labeling作用而确定特定mrna的存在。探针可以按寡核苷酸探针、单链dna探针、双链dna探针和rna探针等形式制备。67、在本文中使用，术语“抗体”，是指针对抗原位点的特异性免疫球蛋白。本发明中的抗体是指与本发明所述的plekhh2蛋白特异性结合的抗体，可以根据本领域中的常规方法来制造抗体。抗体的形式包括多克隆抗体或单克隆抗体、抗体片段(诸如fab、fab'、f(ab')2和fv片段)、单链fv(scfv)抗体、多特异性抗体(诸如双特异性抗体)、单特异性抗体、单价抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体、包含抗体的抗原结合位点的融合蛋白，以及包含抗原结合位点的任何其他修饰的免疫球蛋白分子，只要该抗体表现出所需的生物学结合活性即可。68、在本文中使用，术语“肽”，是指具有与靶物质(本发明所述的生物标志物蛋白)高度结合的能力，并且在热处理或化学处理期间不会发生变性的一类物质。而且，由于其尺寸小，可以通过将其附接到其它蛋白上而用作融合蛋白。具体而言，因为可以特异性地附接到高分子蛋白链上，其可以用作诊断试剂盒和药物递送物质。69、在本文中使用，术语“适配体”，是指一种由特定类型的单链核酸(dna、rna或修饰的核酸)组成的多核苷酸，所述单链核酸自身具有稳定的三级结构，并且具有能够以高亲和力和特异性与靶分子(本发明所述的生物标志物蛋白)结合的特性。如上所述，由于适配体可以像抗体那样特异性结合抗原性物质，但比蛋白更稳定并具有简单的结构，并且是由易于合成的多核苷酸组成，因此可以代替抗体来使用。70、在本文中使用，术语“生物标志物”同“标记物”，是指患者(在本发明中具体指肺动脉高压患者)表型的指示物，例如病理学状态或对治疗剂的可能的反应性的指示物，其可以在所述患者的生物样本中检测到，所述生物标志物包括但不限于：dna、rna、蛋白质、小分子代谢物质、糖类、基于糖脂的分子等；在本发明的具体实施例中，所述生物标志物为plekhh2。71、在本文中使用，术语“治疗”，通常涉及治疗人类或动物(例如，被兽医所应用)，其中可达到某些预期的治疗效果，例如，抑制病症的发展(包括降低发展速度、使发展停止)、改善病症和治愈病症。还包括作为预防措施(例如预防)的治疗。对还没有发展为病症但有发展为该病症危险的患者的用途，也包括在术语“治疗”中。72、在本文中使用，术语“诊断”，是指基于与个体相关的一个或多个的症状、数据或其他信息，来对个体的健康状态或状况的发现、判断或认知。个体的健康状态可被诊断为健康的/正常的(即不存在疾病或疾患)，或者可被诊断为不健康的/异常的(即存在疾病或疾患)，术语诊断、早期诊断、进行诊断及这些术语的变化型包括与特定疾病或疾患(在本发明中具体指肺动脉高压)相关的疾病/病症的早期发现；疾病的特性或分类；疾病的进展、治愈或复发的发现；个体的处置或治疗后对疾病的反应的发现，在本发明中，所述肺动脉高压的诊断和/或辅助诊断包括对不患有肺动脉高压的个体和患有肺动脉高压的个体进行区分。73、在本文中使用，术语“药物组合物”，可具有选自如下的任一种制剂：片剂、丸剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液剂、乳剂、糖浆、灭菌水溶液剂、非水溶液剂、冻干制剂和栓剂。此外，所述药物组合物可以一次或多次施用。此时，可以以液体制剂、粉剂、气雾剂、胶囊或栓剂的形式施用所述药物组合物。74、所述药物组合物的施用途径包括但不限于：腹膜内、静脉内、肌内、皮下、皮内、经口、局部、鼻内、肺内、直肠内等。当口服施用时，可配制成保护药物组合物中的活性成分以防止其在胃中降解的包衣。此外，可通过任何能够转移至靶组织的装置施用活性成分。在具体实施方案中，本发明提供的药物组合物可根据实际需要制成各种剂型，并可由临床医师根据受试者的种类、年龄、体重和大致疾病状况、给药方式等因素确定对病人有益的剂量进行施用。给药方式例如可以采用注射或其它本领域技术人员公知的任何合适的给药方式。75、在本文中使用，术语“有效量”，是指具有治疗效果的量或在治疗对象中产生治疗效果所需要的量。例如，药物治疗上或药学上有效量是指产生需要的治疗效果所需要的药物的量，治疗效果可以通过临床试验结果、模型动物研究和/或体外研究的结果来反映。药学上有效量取决于几个因素，包括但不限于：治疗对象的特征因素(如身高、体重、性别、年龄和用药史)、罹患疾病的严重程度等。76、相对于现有技术，本发明具有的优点和有益效果：77、(1)本发明采用“遗传家系发现--散发患者验证”的策略首次发现plekhh2是一个全新的肺动脉高压遗传相关基因，基因功能研究结果表明，plekhh2在肺动脉内皮细胞中特异性表达，具有调控bmpr2/tgf-β通路活性、保护肺动脉内皮细胞的潜在功能，此外，本发明发现pelkhh2基因在肺动脉高压病理情况下显著下调，在肺动脉高压动物模型中采用腺病毒上调plekhh2基因的表达能够有效预防、逆转野百合碱(mct)引起的肺动脉高压，证实了plekhh2在预防、治疗和/或诊断肺动脉高压中的有效性，为肺动脉高压的治疗提供了新的治疗靶点，具有重要的临床应用价值。78、(2)本发明首次发现plekhh2、smad7在肺组织中存在竞争性结合hic-5蛋白。肺动脉高压病理情况下，plekhh2蛋白发生突变或者表达量降低，hic-5捕获了更多smad7，阻止了smad7对smad2/3活性的抑制，进而增强了samd2/3信号通路活性，促进了内皮细胞的过度增殖，加速内皮细胞间质化表型转变，最终导致肺动脉高压。上调plekhh2表达可以阻止hic-5与smad7结合，使更多smad7释放到细胞浆中，抑制smad2/3磷酸化，进而治疗肺动脉高压。79、(3)本项目在前期研究成果的基础上，进一步明确了plekhh2保护肺血管重构的分子机制，并提出和验证了多个新的治疗肺动脉高压的思路：80、1)本发明的研究结果表明，hic-5在肺动脉高压疾病情况下高表达，捕获更多smad7蛋白，阻止其抑制smad2/3的功能，因此，降解hic-5为治疗肺动脉高压的潜在策略。81、2)模拟hic-5与plekhh2结合位点设计小分子化合物，减少hic-5与smad7结合，将是新药的研发方向。当前第1页12当前第1页12
文档序号 :
【 40051207 】
技术研发人员：王晓建,吕婷婷,杨伟宪,李天骐,张学佳,马铭婕,谭江山,俞莉萍
技术所有人：中国医学科学院阜外医院
备 注：该技术已申请专利，仅供学习研究，如用于商业用途，请联系技术所有人。
声 明 ：此信息收集于网络，如果你是此专利的发明人不想本网站收录此信息请联系我们，我们会在第一时间删除
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