一种木糖诱导型CRISPRa系统载体及其构建方法和应用

1.一种木糖诱导型crispra系统载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述引物p2f的核苷酸序列如seq idno：5所示；所述引物p3r的核苷酸序列如seq id no：8所示。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述pvprhxbios1与pcrispragalsg4wtf6系统载体偶联的方法如下：

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述引物p14f和p14r的核苷酸序列如seq id no：28-29所示；所述引物p15f和p15r的核苷酸序列如seq id no：30-31所示。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述pvprhxbdes1与pcrispragalsg4wtf6系统载体偶联的方法如下：

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述引物p17f和p17r1的核苷酸序列如seq id no：34-35所示；所述引物p16f和p16r的核苷酸序列如seq id no：32-33所示；所述引物p17f2和p15r的核苷酸序列依次如seq id no：36、seq id no：31所示。

7.利用权利要求1-6任一项所述构建方法获得的木糖诱导型crispra系统载体。

8.如权利要求7所述的木糖诱导型crispra系统载体在检测解脂耶氏酵母细胞利用木糖能力中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，将xdhsg2和xkssg1导入解脂耶氏酵母中，再转入所述木糖诱导型crispra系统载体，检测解脂耶氏酵母细胞利用木糖的能力。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述xdhsg2的序列为gctcgcatgcgcgctatcta；所述xkssg1的序列为gggaaatttcctagtaacgg。