工程化糖基转移酶和甜菊醇糖苷葡糖基化方法与流程

1.一种工程化糖基转移酶，所述工程化糖基转移酶包含与seq id no:758、770、792、954、1002、1054、2600、2718、2814、2884、3016、3082、3244、3346、3502、3696、3956、4256和/或4550具有至少75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多序列同一性的多肽序列。

2.根据权利要求1所述的工程化糖基转移酶，其中所述工程化糖基转移酶的所述多肽序列在选自以下的一个或更多个位置包含至少一个突变或突变集：375、8/375、7、9、10、12、50/137/189/375、53、62/153/155/156/159、62/153/155/156/159/427、62/153/155/199/406、65、68、99、106、110、115、116、131、132、136、137/164/375、153、153/155/156、153/155/156/159/199/238/406、153/155/237/238/239/406、153/155/238/239、153/155/427、153/156/159、153/156/199/237/427、153/156/427、153/159/237/238/352、153/176/181/427、155/156、155/156/176/181/199、155/156/176/238/427、155/181/199/238/406、156/199、156/199/427、164/375/433、170、178、190、192、194、200、220、223/375、238、242、245、257、272、280、302、304、335、385、395、399、402、408、412、416、423、427、445、447和449，其中所述位置参照seq id no:4256来编号。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的工程化糖基转移酶，其中所述工程化糖基转移酶的所述多肽序列在选自375l和8v/375l的一个或更多个位置包含至少一个突变或突变集，其中所述位置参照seq id no:4256来编号。

4.根据权利要求1所述的工程化糖基转移酶，其中所述工程化糖基转移酶的所述多肽序列包含：

5.根据前述权利要求中任一项所述的工程化糖基转移酶，其中：

6.根据前述权利要求中任一项所述的工程化糖基转移酶，其中所述工程化糖基转移酶的所述多肽序列包含表14.1、15.1、15.2、15.3、16.1、17.1、43.1、43.2、44.2、45.1、45.3、46.1、46.2、46.3、47.1、47.2、47.3、48.1、48.2、49.1、49.3、50.1、50.2、50.3、50.4、51.1、51.2、52.1、53.1、53.3、54.1、54.2、54.3、55.1、55.2、55.3、56.1、56.2、56.3、57.1、58.1、58.2、58.3、59.1、59.2和/或59.3中提供的变体工程化糖基转移酶。

7.一种工程化多核苷酸，所述工程化多核苷酸编码至少一种权利要求1-6的任一项中提供的工程化糖基转移酶多肽。

8.一种载体，所述载体包含至少一种根据权利要求7所述的工程化多核苷酸，任选地，其中所述载体还包含至少一种控制序列。

9.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含：

10.一种用于产生至少一种权利要求1-6的任一项中提供的工程化糖基转移酶的方法，所述方法包括在使得根据权利要求9所述的宿主细胞产生所述工程化糖基转移酶的条件下培养所述宿主细胞，任选地，其中所述方法还包括回收所述工程化糖基转移酶的步骤。

11.一种组合物，所述组合物包含至少一种根据权利要求1-6的任一项所述的工程化糖基转移酶。

12.一种用于以下的方法：

13.根据权利要求12所述的方法，其中：

14.一种用于产生以下的方法：

15.根据权利要求14所述的方法，其中：