一种末端修复驱动的二次体外转录机器用于单分子检测人类癌症中碱性磷酸酶水平

1.一种用于检测人类癌症中碱性磷酸酶水平的生物传感器，其特征在于，所述传感器包括：发夹探针1(hp1)、发夹探针2(hp2)、信号探针、t7 rna聚合酶、taq dna连接酶、dsn、ntps、rnase；将发夹探针1(hp1)和样品溶液混合以进行alp催化的hp1中3′-po4基团的去除，去磷酸化后，添加发夹探针2(hp2)、信号探针、t7 rna聚合酶、taq dna连接酶、dsn、ntps、rnase进行孵育后，检测样品中的碱性磷酸酶水平；

2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述发夹探针1(hp1)、发夹探针2(hp2)添加的浓度比为：1：4。

3.根据权利要求2所述的生物传感器，其特征在于，所述信号探针的添加用量为：600nm，所述t7 rna聚合酶添加量为：50u，所述taq dna连接酶添加量为：20u，所述dsn添加量为：0.7u，所述ntps添加量为：500μm，所述rnase添加量为：20u。

4.一种非诊断目的的利用权利要求1～3任一项所述的生物传感器的碱性磷酸酶检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中的孵育条件：37℃条件下孵育60min。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述发夹探针1(hp1)、发夹探针2(hp2)添加的浓度比为：1：4；所述信号探针的添加浓度为：500nm，所述t7 rna聚合酶添加量为：50u，所述taq dna连接酶添加量为：20u，所述dsn添加量为：0.7u，所述ntps添加量为：500μm，所述rnase添加量为：20u。

7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述样品溶液为，样品同10×cutsmart缓冲液混和后得到的；所述10×cutsmart缓冲液的添加量为：2μl。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，还包括10×rnapol缓冲液、10×taq dna连接酶反应缓冲液、10×dsn缓冲液、depc；优选的，所述10×rnapol缓冲液的添加量为：2μl；所述10×taq dna连接酶反应缓冲液的添加量为：2μl；所述10×dsn缓冲液的添加量为：2μl；所述depc添加量为：3.3μl。

9.权利要求1～3任一所述的生物传感器在制备检测碱性磷酸酶水平的试剂盒中的应用。

10.权利要求1～3任一所述的生物传感器或权利要求4～8任一所述的检测方法在检测碱性磷酸酶水平中的应用，所述应用以非疾病的诊断与治疗为目的。