一种细胞制剂支原体检测方法及其试剂盒与流程

1.一种细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，将定量待测细胞制剂样品离心，收集上清液a同时收集沉淀细胞；将沉淀细胞加入定量ph为3.5～4.5的缓冲溶液悬浮机械破碎得到细胞破碎液b；将上清液a与细胞破碎液b分别进行步骤(1)～(3)的处理检测，获得上清液a的吸光信号强度a，细胞破碎液b的吸光信号强度b；吸光信号强度a、吸光信号强度b代入步骤(4)获得的映射关系中，得到上清液中a的支原体浓度a和细胞破碎液b中的支原体浓度b，支原体浓度a与支原体浓度b的比值记作环境影响系数α。

3.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，待测细胞制剂样品、α-甘露糖苷酶、6-氯-3-吲哚-a-d-甘露糖苷、ph为3.5～4.5的缓冲溶液混合的孵育体系中，6-氯-3-吲哚-a-d-甘露糖苷的浓度为2.5～3.5mg/ml，α-甘露糖苷酶的浓度按照蛋白计量为10～15mg/ml。

4.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，ph为3.5～4.5的缓冲溶液为0.08～0.15mol/l的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，将步骤(2)反应后的溶液定容至0.8～1.5ml。

5.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，步骤(1)中孵育的时间为20～30分钟。

6.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，6-氯-3-吲哚-a-d-甘露糖苷的溶剂为含0.7％～0.8％tritonx-100的ph为3.5～4.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。

7.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，缓存溶液的ph为3.9～4.1。

8.根据权利要求1所述细胞制剂支原体检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

9.一种细胞制剂支原体检测试剂盒，其特征在于，检测试剂盒包含α-甘露糖苷酶、25～70mg/ml的6-氯-3-吲哚-a-d-甘露糖苷、ph为3.9～4.1的0.08～0.15mol/l的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液、100～500mg/ml苦马豆素抑制剂。

10.一种细胞制剂支原体检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包含说明书，所述说明书记载如权利要求1-8所述细胞制剂支原体检测方法中的至少一种；α-甘露糖苷酶为蛋白计量为100～300mg/ml的α-甘露糖苷酶，α-甘露糖苷酶的溶剂为ph为3.9～4.1的0.08～0.15mol/l的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液，6-氯-3-吲哚-a-d-甘露糖苷的溶剂为含0.7％～0.8％tritonx-100的ph为3.5～4.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。