一种三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法与流程
技术特征:
1.一种三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述核糖激酶的氨基酸序列包括seq id no.1或seq id no.2所示的序列。
3.根据权利要求1或2所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述磷酸戊糖变位酶的氨基酸序列包括seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5或seq idno.6所示的序列。
4.根据权利要求1-3任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述嘌呤核苷磷酸化酶的氨基酸序列包括seq id no.7、seq id no.8或seq id no.9所示的序列。
5.根据权利要求1-4任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述嘧啶核苷磷酸化酶的氨基酸序列包括seq id no.10、seq id no.11或seq idno.12所示的序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述衍生物包括戊醛糖和脱氧糖;
7.根据权利要求1-6任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述嘌呤碱基包括嘌呤、腺嘌呤、鸟嘌呤、6-羟基嘌呤、6-氟嘌呤、6-氯嘌呤、6-甲氨基嘌呤、6-二甲基氨基嘌呤、6-三氟甲基氨基嘌呤、6-苯甲酰基氨基嘌呤、6-乙酰基氨基嘌呤、6-羟氨基嘌呤、6-甲氧基嘌呤、6-苯甲酰氧基嘌呤、6-甲基嘌呤、6-乙基嘌呤、6-三氟甲基嘌呤、6-苯基嘌呤、6-巯基嘌呤、6-甲巯基嘌呤、2,6-二氨基嘌呤、2-氨基-6-氯嘌呤、2-氨基-6-碘嘌呤、2-氨基嘌呤、2-氨基-6-巯基嘌呤、2-氨基-6-甲巯基嘌呤、2-氨基-6-羟氨基嘌呤、2-氨基-6-甲氧基嘌呤、2-氨基-6-甲基嘌呤、2-氨基-6-环丙基氨基甲基嘌呤、2-氨基-6-苯基嘌呤、2-氨基-8-溴嘌呤、6-氰基嘌呤、2-氯腺嘌呤、2-氟腺嘌呤、2-丙基鸟嘌呤、2-氨基丙基腺嘌呤、3-脱氮腺嘌呤、3-脱氮鸟嘌呤、9-甲基次黄嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤、6-甲基腺嘌呤、6-硫鸟嘌呤、7-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、7-脱氮鸟嘌呤、7-脱氮-8-氮鸟嘌呤、8-硝基腺嘌呤、8-硝基鸟嘌呤、8-氟腺嘌呤、8-氯腺嘌呤、8-溴腺嘌呤、8-氨基腺嘌呤、8-羟基腺嘌呤、8-氟鸟嘌呤、8-氯鸟嘌呤、8-溴鸟嘌呤、8-氨基鸟嘌呤或8-羟基鸟嘌呤。
8.根据权利要求1-7任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述嘧啶碱基包括胞嘧啶、尿嘧啶、5-氟胞嘧啶、5-氟尿嘧啶、5-氯胞嘧啶、5-氯尿嘧啶、5-溴胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-碘胞嘧啶、5-碘尿嘧啶、5-甲基胞嘧啶、5-甲基尿嘧啶、5-乙基胞嘧啶、5-乙基尿嘧啶、5-氟甲基胞嘧啶、5-氟甲基尿嘧啶、5-三氟甲基胞嘧啶、5-三氟甲基尿嘧啶、5-乙烯基尿嘧啶、5-溴乙烯基尿嘧啶、5-氯乙烯基尿嘧啶、5-乙炔基胞嘧啶、5-乙炔基尿嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-羟基胞嘧啶、5-甲氧基尿嘧啶、2-硫胞嘧啶、2-硫尿嘧啶、2-硫胸腺嘧啶、3-甲基胞嘧啶、4-硫尿嘧啶、4-硫胸腺嘧啶、5、6-二氢胞嘧啶、5-硝基胞嘧啶、n4-乙基胞嘧啶或n4-乙酰胞嘧啶。
9.根据权利要求1-8任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述核糖化合物和核酸碱基的摩尔比为1:(1.1~1.3);
10.根据权利要求1-8任一项所述的三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法,其特征在于,所述反应的温度为30~40℃,时间为0.5~2h。
技术总结
本发明公开了一种三酶级联催化合成腺苷和/或尿苷的方法。所述方法包括:以核糖化合物和核酸碱基为底物,以核糖激酶、磷酸戊糖变位酶和核苷磷酸化酶为催化剂,进行反应,合成腺苷和/或尿苷;所述核糖化合物包括D‑核糖和/或其衍生物;所述核酸碱基包括嘌呤碱基和/或嘧啶碱基;所述核苷磷酸化酶包括嘌呤核苷磷酸化酶和/或嘧啶核苷磷酸化酶。本发明整合RK、PPM和NP,构建三酶级联合成腺/尿苷的方法,并挖掘RK、PPM和NP进行组合,实现高效合成腺苷和/或尿苷。
技术研发人员:马学洋,钱雄锋,刘超,张跃
受保护的技术使用者:上海飞腾医药科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
技术研发人员:马学洋,钱雄锋,刘超,张跃
技术所有人:上海飞腾医药科技有限公司
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