一种CRISPR/Cas9介导的完整全长蜘蛛丝及其制备方法和应用与流程
技术特征:
1.一种crispr/cas9介导的完整全长蜘蛛丝,其特征在于:基于家蚕丝的最小基本单元结构模型,使得完整全长蜘蛛丝蛋白在家蚕丝腺体中表达;其中,所述最小基本单元结构模型为fib-h12fib-l12p252。
2.一种crispr/cas9介导的完整全长蜘蛛丝,其特征在于:基于crispr/cas9技术将家蚕丝素重链基因fib-h的中间重复区域替换为完整全长蜘蛛丝蛋白一级序列,并由获得的相应转基因蚕生产而得。
3.根据权利要求1或2所述的完整全长蜘蛛丝,其特征在于:所述完整全长蜘蛛丝蛋白的来源包括不同蜘蛛物种的小壶状腺丝、大壶状腺丝、鞭状腺丝、聚状腺丝、葡萄状腺丝、管状腺丝中的一种或几种。
4.根据权利要求1或2所述的完整全长蜘蛛丝,其特征在于:所述完整全长蜘蛛丝蛋白包括完整一级序列或其突变体、或任意其他氨基酸的替换和增添。
5.一种crispr/cas9介导的完整全长蜘蛛丝的制备方法,包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的引物为:
7.一种如权利要求1或2所述的crispr/cas9介导的全长蜘蛛丝在生物医药领域、智能生物穿戴领域、纺织服装领域、军工领域、航空航天领域、医美领域中的应用。
8.一种蛋白丝纤维,其特征在于:依据如权利要求1所述的最小基本单元结构模型在转基因蚕丝腺体中生产。
9.根据权利要求8所述的蛋白丝纤维,其特征在于:所述蛋白丝纤维包括蜘蛛丝、昆虫丝、海蛞蝓丝或其他任何天然蛋白丝纤维。
10.根据权利要求8所述的蛋白丝纤维,其特征在于:所述蛋白丝纤维中的蛋白包括人工设计的非天然蛋白,以及天然蛋白或其中的部分序列。
技术总结
本发明涉及一种CRISPR/Cas9介导的完整蜘蛛丝及其在家蚕丝腺体中“本土化”成丝的制备方法和应用:基于蚕丝的最小基本单元结构模型使用完整全长蜘蛛丝替换家蚕Fib‑H,首次获得了完整全长的转基因蜘蛛丝及能将其在家蚕丝腺体中“本土化”表达成丝的转基因蚕。得到了兼具高强度(1299MPa)和超韧性(319MJ/m^3)的蛛丝,是凯夫拉纤维韧性的六倍之多。本发明所提出的最小蚕丝基本单元结构模型,为家蚕作为“天然纺丝器”生产天然的或者人工设计的蛋白丝纤维提供了切实可行的理论指导和技术路线。本发明涉及的转基因蜘蛛丝可用于我国军工,航空航天,国防以及组织工程等领域,从而突破美国在此领域的垄断技术。
技术研发人员:请求不公布姓名
受保护的技术使用者:上海双心实业有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
文档序号 :
【 40001344 】
技术研发人员:请求不公布姓名
技术所有人:上海双心实业有限公司
备 注:该技术已申请专利,仅供学习研究,如用于商业用途,请联系技术所有人。
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