一种裂壶菌和红法夫酵母联合培养生产富含虾青素油脂的方法与流程
技术特征:
1.一种裂壶菌和红法夫酵母联合发酵培养生产富含虾青素油脂的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3联合发酵培养的过程中额外添加木糖、葡萄糖或者以上两者的混合物,和/或,所述步骤3,每1l红法夫酵母和裂壶藻混合酵液中,所述木糖的投料0~30g,优选20g,和/或,所述步骤3,每1l红法夫酵母和裂壶藻混合酵液中,所述葡萄糖的投料0~30g,优选10g。
3.根据权利要求1或2任一所述的方法,其特征在于,所述步骤3中,红法夫酵母酵液接种至培养36~60h后的裂壶藻酵液,优选接种至培养48h后的裂壶藻酵液,和/或,所述步骤3中,所述红法夫酵母酵液接种至裂壶藻酵液的接种量为裂壶藻发酵液体积的30%~100%。
4.根据权利要求1至3任一所述方法,其特征在于,所述步骤3中,所述联合发酵培养在光照下进行,和/或,步骤3中,光照强度8000~12000lux,优选10000lux,和/或,步骤3中,发酵过程持续光照培养72~120h,优选96h,和/或,所述步骤3中,所述联合发酵培养的温度为20~30℃,优选25℃,和/或,所述步骤3中,所述联合发酵培养的摇床转速为180~220rpm,优选180rpm。
5.根据权利要求1至4任一所述的方法,其特征在于,所述步骤1中红法夫酵母活化温度20~30℃,优选25℃,和/或,所述步骤1中红法夫酵母活化过程中混匀采用摇床,所述摇床转速为160~200rpm,优选180rpm,和/或,所述步骤1中红法夫酵母的活化时间为48~96h,优选72h,和/或,所述步骤1中裂壶藻种子液的活化温度20~30℃,和/或,所述步骤1裂壶藻活化过程中的转速为160~200rpm,优选180rpm,和/或,所述步骤1裂壶藻活化时间为12~36h,优选24h。
6.根据权利要求1至5任一所述的方法,其特征在于,所述步骤2中红法夫酵母的接种量为3~10%,优选5%,和/或,所述步骤2中裂壶藻种子液的接种量为3~7%,优选5%,和/或,所述步骤2中,裂壶藻酵液的培养条件为温度20~30℃,优选25℃,和/或,所述步骤2中,裂壶藻酵液的增殖发酵的摇床转速为160~200rpm,优选180rpm,和/或,所述步骤2中,裂壶藻酵液的时间36~60h,优选48h,和/或,所述步骤2中,所述红法夫酵液的培养温度为20~30℃,和/或,所述步骤2中,所述红法夫酵液的摇床速度为160~200rpm,优选180rpm,和/或,所述步骤2中,所述红法夫酵液的的培养温度为20~25℃,优选22℃。
7.根据权利要求1至6任一所述方法,其特征在于,所述步骤1中,裂壶藻接种于种子培养基,该种子培养基包括,葡萄糖40~70g/l、酵母浸出粉8~12g/l、硫酸铵0.8~1.2g/l、无水硫酸钠13~17g/l、七水硫酸镁3.5~4.6g/l、磷酸二氢钾0.8~1.2g/l无水、氯化钙0.15~0.19g/l、碳酸钙1.5~2.5g/l,调节ph 5.5~6.0,溶剂为水。
8.根据权利要求1至7任一所述方法,其特征在于,所述步骤2中裂壶藻种子液接种至发酵培养基,该发酵培养基包括,葡萄糖40~70g/l,酵母浸出粉8~12g/l,硫酸铵0.8~1.2g/l,无水硫酸钠13~17g/l,碳酸钙1.5~2.5g/l,氯化钠0.08~0.12g/l,无水氯化钙0.15~0.19g/l,氯化钾0.3~0.6g/l,七水硫酸镁3.7~4.4g/l,硫酸钾0.5~0.7g/l,磷酸二氢钾0.8~1.2g/l,硫酸铜0.03~0.06g/l,调节ph 5.5~6.0,溶剂为水。
9.根据权利要求1至8任一所述方法,其特征在于,所述步骤1中,红法夫酵母菌接种至种子培养基,该种子培养基包括葡萄糖25~35g/l,酵母浸出粉3.8~4.9g/l,碳酸钙1.5~2.5g/l,氯化钠0.08~0.12g/l,氯化钾0.013~0.017g/l,磷酸二氢钾1.2~1.6g/l,无水氯化钙0.10~0.14g/l,硫酸铜0.03~0.07g/l,调节ph 5.5~6.0,溶剂为水。
10.根据权利要求1至9任一所述方法,其特征在于,所述步骤2中,红法夫种子液接种至发酵培养基,该发酵培养基包括葡萄糖28~35g/l,酵母浸出粉3.8~4.8g/l,碳酸钙1.5~2.5g/l,氯化钠0.07~0.12g/l,无水氯化钙0.10~0.14g/l,氯化钾0.013~0.017g/l,硫酸镁2.0~2.9g/l,硫酸钾0.4~0.7g/l,磷酸二氢钾1.0~1.6g/l,硫酸铵0.8~1.2g/l,硫酸铜0.04~0.06g/l,调节ph5.5~6.5,溶剂为水。
技术总结
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种裂壶藻和红法夫酵母联合培养生产富含DHA和虾青素油脂的方法。本发明在裂壶藻生长稳定期,引入红法夫酵母,酵母的快速生长会导致有机酸和CO2的产生,从而降低发酵培养基的pH。在低pH环境下,裂壶藻的生长会逐渐转向脂质的积累,进而提高油脂的产量;在联合培养过程中,额外添加葡萄糖和木糖作为碳源,红法夫酵母以木糖为碳源进行生长代谢,其代谢产物可为裂壶藻的共培养提供更多营养物质;所产的DHA油中蕴含虾青素,可提高油脂中DHA的抗氧化能力,有效避免DHA在储存过程中氧化。
技术研发人员:陈礼毅,钟惠昌,陈水荣,李璟,赵小龙
受保护的技术使用者:厦门汇盛生物有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
技术研发人员:陈礼毅,钟惠昌,陈水荣,李璟,赵小龙
技术所有人:厦门汇盛生物有限公司
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