一株产气荚膜梭菌CPB单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用的制作方法

1.一种编码c型产气荚膜梭菌cpb的生物序列，所述生物序列是指c型产气荚膜梭菌的cpb序列中亲水性较高的第30位-第306位氨基酸区域，其氨基酸序列如seq id no：1所示。

2.一种重组蛋白，所述重组蛋白由权利要求1所述的生物序列编码：其是由权利要求1所述的生物序列编码合成基因片段后构建到载体中，转化至感受态细胞后，由感受态细胞分泌的重组蛋白，命名为rcpbδ。

3.一种分泌抗产气荚膜梭菌cpb单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株的保藏号为：cgmcc no.46025。

4.一种如权利要求3所述杂交瘤细胞株的筛选方法，所述筛选方法包括如下步骤：

5.如权利要求4所述方法，在步骤s1中，所述免疫原为灭活后的产气荚膜梭菌天然cpb。

6.如权利要求4所述方法，在步骤s3中，所述阳性克隆筛选是指以权利要求2所述重组蛋白rcpbδ为包被抗原的间接elisa方法筛选阳性杂交瘤细胞；所述亚克隆筛选是指用制备的产气荚膜梭菌天然毒素对阳性杂交瘤细胞的细胞上清进行血清中和实验，并进行亚克隆后筛选活性较高的杂交瘤细胞株。

7.一种抗产气荚膜梭菌cpb抗体，所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；所述单克隆抗体是由权利要求3所述杂交瘤细胞株的培养液中获得，或用权利要求3所述杂交瘤细胞株接种到小鼠腹腔产生腹水而获得；所述多克隆抗体是以灭活的天然cpb免疫小鼠后，用权利要求2所述重组蛋白rcpbδ接种到小鼠腹腔产生腹水而获得。

8.一种产气荚膜梭菌cpb的抗体阻断elisa检测方法，所述方法中一抗为权利要求7所述的多克隆抗体，所述二抗为hrp标记的单克隆抗体；所述hrp标记的单克隆抗体是将权利要求7所述单克隆抗体的腹水纯化后进行hrp偶联标记的单克隆抗体；所述cpb多克隆抗体的工作稀释度为1：40，所述单克隆抗体1f11的工作浓度为1:16000。

9.一种权利要求7所述抗体在制备检测产气荚膜梭菌cpb的试剂中的应用。

10.一种检测产气荚膜梭菌cpb的试剂盒，所述试剂盒包含权利要求7所述抗体。