一种蜘蛛毒液来源的重组透明质酸酶、酵母工程菌及构建方法与应用与流程
技术特征:
1.一种重组透明质酸酶,其特征在于,所述重组透明质酸酶的氨基酸序列如seq idno.5所示。
2.权利要求1所述重组透明质酸酶的编码基因,其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如seq id no.6所示。
3.一种重组透明质酸酶,其特征在于,在权利要求1所述重组透明质酸酶的氨基酸序列seq id no.5上插入6×his标签和sumo标签,所述重组透明质酸酶的氨基酸序列如seq idno.16所示。
4.权利要求3所述重组透明质酸酶的编码基因,其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如seq id no.17所示。
5.一种重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述重组透明质酸酶的编码基因seq idno.6或权利要求4所述重组透明质酸酶的编码基因seq id no.17;
6.一种酵母工程菌,其特征在于,所述酵母工程菌为在酵母菌中导入权利要求2所述重组透明质酸酶的编码基因seq id no.6或权利要求4所述重组透明质酸酶的编码基因seqid no.17;
7.权利要求6所述酵母工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
8.一种pichia pastoris haase-loxin-9k-gs115,已于2024年6月19号保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国.武汉.武汉大学,保藏编号cctcc no:m 20241298。
9.权利要求2所述重组透明质酸酶的编码基因、权利要求4所述重组透明质酸酶的编码基因、权利要求5所述重组载体、重组菌、权利要求6所述酵母工程菌或权利要求8所述pichia pastoris haase-loxin-9k-gs115在降解透明质酸中的应用;
10.权利要求2所述重组透明质酸酶的编码基因、权利要求5所述重组载体、重组菌、权利要求6所述酵母工程菌在制备重组透明质酸酶中的应用,所述重组透明质酸酶氨基酸序列如seq id no.5所示;
技术总结
本发明提供了一种蜘蛛毒液来源的重组透明质酸酶、酵母工程菌及构建方法与应用,属于基因工程技术领域,主要提供了一种重组透明质酸酶,所述重组透明质酸酶氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示;一种酵母工程菌,构建酵母工程菌时在酵母菌中导入所述重组透明质酸酶的编码基因,使用pPIC9K载体,pPIC9K载体中的信号肽α‑factor替换为sp23信号肽;本发明首次利用酵母菌成功表达了棕色蜘蛛毒液来源的重组透明质酸酶,为实际应用增加了透明质酸酶的多样性,提高市场竞争力。
技术研发人员:赵玉雪,康传利,刘洋,廉少杰,窦茜茜,李海军,王春喜,刘磊,郑德强,贾庆文,刘玉杰,刘静
受保护的技术使用者:山东福瑞达医药集团有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/11/14
技术研发人员:赵玉雪,康传利,刘洋,廉少杰,窦茜茜,李海军,王春喜,刘磊,郑德强,贾庆文,刘玉杰,刘静
技术所有人:山东福瑞达医药集团有限公司
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