植物源类Q型烟粉虱、温室白粉虱引诱剂、趋避剂的制作方法

本发明涉及昆虫化学生态，特别是涉及植物源类昆虫引诱剂、趋避剂研发方案及q型烟粉虱、温室白粉虱引诱剂、趋避剂配方。

背景技术：

1、烟粉虱bemisia tabaci(gennadius)和温室白粉虱trialeurodes vaporariorum(westwood)均属同翅目，粉虱科，都是重要的世界性害虫，给农业生产造成了巨大的经济损失。在田间，q型烟粉虱和温室白粉虱对常规农药已经表现出较强的抗性，单纯的化学防治已经起不到很好的防治效果。植物挥发性信息化合物是植物在长期进化过程中为了防御害虫为害或吸引害虫的天敌与昆虫协同进化形成的挥发性成分，在植食性昆虫寄主选择定向中的重要作用。昆虫化学信息物质对环境无污染、使用剂量微小(mg～μg级)、活性强。90年代以来，寄主植物—害虫—天敌三营养级间的化学通讯成为研究热点，其中一些寄主植物的气味招引害虫定位、刺激取食，另外一些植物气味对昆虫具有趋避作用。从可持续发展的眼光来看,植物挥发性信息化合物在害虫的综合防治中具有维护物种多样性和生态系统稳定性等众多优点,符合对害虫可持续控制的目标。为了克服传统化学农药使用对q型烟粉虱和温室白粉虱天敌和非靶标生物的伤害和农药残留的问题，本发明提供植物挥发物类昆虫引诱剂、趋避剂研发方案及q型烟粉虱和温室白粉虱引诱剂、趋避剂配方。

技术实现思路

1、本发明提供了一种植物挥发物类q型烟粉虱引诱剂、一种q型烟粉虱趋避剂、一种温室白粉虱引诱剂、一种温室白粉虱趋避剂的配方，包括研发的技术方案以及所述引诱剂、趋避剂配方。

2、1技术方案

3、1.1从为害寄主植物(本实验为番茄枝条)中分离鉴定挥发物成分采用吸附法从健壮番茄枝条中分离鉴定出19种挥发物。制作两头带有口径为6～10毫米细小开口、中空的玻璃柱，容积4.5～5.5升，进口接压缩空气瓶，出口依次接tenax ta吸附柱、真空泵。在吸附挥发物之前，将tenax ta柱在270～280℃通氮活化4～8小时，在玻璃容器中加入190～210克健壮番茄枝条，吹入空气，同时从吸附柱后抽气，在进口前、tenax ta柱后用流量计控制流量，进、出气流量都为300毫升/分钟。

4、12小时后取下吸附柱，用重蒸乙醚淋洗，再用氮气缓慢吹扫至20微升，吸取1μl注入gc-ms检测，配合标样鉴定组分。

5、鉴定了番茄枝条挥发物中19种化学组分：3-蒈烯(3-carene)、柠檬烯(limonene)、萜品油烯(terpinolene)、α-水芹烯(α-phellandrene)、β-水芹烯(β-phellandrene)、罗勒烯(ocimene)、月桂烯(myrcene)、顺-3-己烯醇(cis-3-hexenol)、反-2-己烯醇(trans-2-hexanol)、里那醇(linalool)、苯甲醇(benzyl alcohol)、桉油醇(eucalyptol)、壬醛(nonanal)、辛醛(octanal)、反-2-己烯醛(trans-2-hexenal)、顺3己烯乙酸酯(cis-3-hexenyl acetate)、水杨酸甲酯(methyl salicylate)、丁子香酚(eugenol)、愈创木酚(guaiacol)。

6、1.2配置不同浓度挥发物成分

7、实验试剂可从试剂公司购买，本发明所用试剂从百灵威和sigma公司采购。按以下方法制备引诱剂诱芯：1)用正己烷为溶剂，将3-蒈烯、柠檬烯、萜品油烯、α-水芹烯、β-水芹烯、罗勒烯、月桂烯、顺-3-己烯醇、反-2-己烯醇、里那醇、苯甲醇、桉油醇、壬醛、辛醛、反-2-己烯醛、顺3己烯乙酸酯、水杨酸甲酯、丁子香酚、愈创木酚分别配成浓度为0.0001～100μg/ml(10-1、10-3、10-5、10-7)4个浓度梯度的味源物。2)用无水乙醇浸泡天然橡胶制成的橡皮头24小时以上，晾干，再用以上不同浓度的挥发物浸泡这样的橡皮头24小时，就制成了诱芯。1.3测试不同浓度挥发物成分对昆虫的引诱以及趋避作用

8、利用以上诱芯，以空白黄板和挂了正己烷诱芯的黄板作为对照，共78个不同诱芯，每个处理至少重复6次，测试各种诱芯对q型烟粉虱以及温室白粉虱的引诱效果以及趋避效果。黄板悬挂方法为悬挂于1.5米的竹竿顶部，一个星期后查看黄板上的烟粉虱和温室白粉虱数量。结果见表1，表2。

9、筛选出对q型烟粉虱具有引诱效果的10-5的顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、苯甲醇和对q型烟粉虱有趋避作用的10-1浓度的3-蒈烯、顺-3-己烯醇、水杨酸甲酯。对温室白粉虱具有引诱效果的10-5的3-蒈烯、顺-3-己烯醇、里那醇和对温室白粉虱具有趋避作用的10-1的顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、水杨酸甲酯。

10、表1.正己烷为溶剂，不同化合物溶液配制成不同浓度的引诱剂对q型烟粉虱的诱集数的影响(头/板)

11、

12、*表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,lsd multiplecomparisons.p<0.05)。

13、表2.正己烷为溶剂，不同化合物溶液配制成不同浓度的引诱剂对温室白粉虱的诱集数的影响(头/板)

14、

15、

16、*表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,lsd multiplecomparisons.p<0.05)。

17、1.4测试对昆虫具有引诱、趋避效果的不同浓度挥发物组分组合使用效果根据实验1的结果，分别选用对q型烟粉虱具有引诱效果的10-5的顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、苯甲醇和对q型烟粉虱有趋避作用的10-1浓度的3-蒈烯、顺-3-己烯醇、水杨酸甲酯作为原料，不同化合物溶液按等体积比混合，以不加诱芯的黄板和各单个化合物溶液配成的诱芯作为对照，共配制成个15个不同编号的诱芯(0:空白对照、1:顺-3-己烯醇(10-5)、2:苯甲醇(10-5)、3:反-2-己烯醛(10-5)、4:顺-3-己烯醇(10-5)+苯甲醇(10-5)、5:苯甲醇(10-5)+反-2-己烯醛(10-5)、6:顺-3-己烯醇(10-5)+反-2-己烯醛(10-5)、7:顺-3-己烯醇(10-5)+苯甲醇(10-5)+反-2-己烯醛(10-5)、8:3-蒈烯(10-1)、9:顺-3-己烯醇(10-1)、10:水杨酸甲酯(10-1)、11:3-蒈烯+顺-3-己烯醇(10-1)、12:顺-3-己烯醇(10-1)+水杨酸甲酯(10-1)、13:3-蒈烯(10-1)+水杨酸甲酯(10-1)、14:3-蒈烯(10-1)+顺-3-己烯醇(10-1)+水杨酸甲酯(10-1))测试它们对q型烟粉虱引诱效果和趋避效果。效果见表3(q型烟粉虱引诱效果)、表4(q型烟粉虱趋避效果)。

18、选用对温室白粉虱具有引诱效果的10-5的3-蒈烯、顺-3-己烯醇、里那醇和对温室白粉虱具有趋避作用的10-1的顺-3-己烯醇、反-2-己烯醛、水杨酸甲酯作为原料，不同化合物溶液按等体积比混合，以不加诱芯的黄板和各单个化合物溶液配成的诱芯作为对照，配制成个15个不同编号的诱芯(0:空白对照、1：3-蒈烯(10-5)、2:顺-3-己烯醇(10-5)、3:里那醇(10-5)、4:3-蒈烯(10-5)+顺-3-己烯醇(10-5)、5:3-蒈烯(10-5)+里那醇(10-5)、6:顺-3-己烯醇(10-5)+里那醇(10-5)、7:顺-3-己烯醇(10-5)+3-蒈烯(10-5)+里那醇(10-5)、8:顺-3-己烯醇(10-1)、9:水杨酸甲酯(10-1)、10:反-2-己烯醛(10-1)、11:顺-3-己烯醇(10-1)+水杨酸甲酯(10-1)、12:顺-3-己烯醇+反-2-己烯醛(10-1)、13:水杨酸甲酯(10-1)+反-2-己烯醛(10-1)、14:水杨酸甲酯(10-1)+反-2-己烯醛(10-1)+顺-3-己烯醇(10-1))，测试它们对温室白粉虱的引诱效果和趋避效果。效果见表5(温室白粉虱引诱效果)、表6(温室白粉虱趋避效果)。

19、表3.特定浓度单组份具有引诱效果的化合物组合配成的诱芯对q型烟粉虱的引诱作用

20、

21、相同字母表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,duncan’s multiple comparisons.p>0.05)

22、表4.特定浓度单组份具有趋避效果的化合物组合配成的诱芯对q型烟粉虱的趋避作用

23、

24、相同字母表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,duncan’s multiple comparisons.p>0.05)

25、表5.特定浓度对白粉虱有引诱作用的单体化合物组配成的诱芯对白粉虱的引诱作用

26、

27、

28、相同字母表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,duncan’s multiple comparisons.p>0.05)

29、表6.特定浓度对白粉虱有趋避作用的单体化合物组配成的诱芯对温室白粉虱的趋避作用

30、

31、相同字母表示引诱效果与空白对照差异显著(spss13.0,one-way anona,duncan’s multiple comparisons.p>0.05)

32、2实验结果和配方

33、本研究发现两种醇类顺-3-己烯醇、苯甲醇和一种醛类反-2-己烯醛在10-5浓度对q型烟粉虱具有引诱作用；一种烯3-蒈烯、一种醛类反-2-己烯醛和一种酯水杨酸甲酯在10-1浓度对q型烟粉虱有趋避作用；一种烯类3-蒈烯两种醇类顺-3-己烯醇、里那醇在10-5浓度对温室白粉虱有引诱作用，一种醇顺-3-己烯醇、一种醛反-2-己烯醛和一种酯水杨酸甲酯在10-1浓度对温室白粉虱有趋避作用。

34、本研究利用对q型烟粉虱具有引诱作用的3种化合物组合发现它们能够显著增强对q型烟粉虱的引诱作用(表3)，利用对q型烟粉虱具有趋避作用的3种化合物组合发现它们组合能够显著增强对q型烟粉虱的趋避作用(表4)。利用在特定浓度下对温室白粉虱有引诱作用的化合物组合，发现它们能够显著增强对温室白粉虱的引诱作用(表5)；利用在特定浓度下对温室白粉虱具有趋避作用的化合物组合，发现它们的趋避作用增强(表6)。

35、本研究所涉及的技术方法以及结果仅用于说明本发明，是为了更好的使本领域技术人员能够理解本专利，不能理解为是对本专利包括范围的限制。该领域的技术工程师可根据上述发明的内容对本发明作出一些非本质的改进和调整。只要是根据本专利所揭示精神的所作的任何等同变更或修饰，均落入本专利包括的范围。