一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器及其制备方法和应用

1.一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤一中，多肽-金团簇的制备方法包括：

3.根据权利要求1所述的一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤一中，组织蛋白酶b的特异性酶切底物多肽序列为：如seq id no.1所示的h2n-ccyffgflgkkkkk-cooh或如seq id no.2所示的h2n-ffgflgkkkkkycc-cooh。

4.根据权利要求1所述的一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，镀金纳米电极的尖端直径为450-550nm。

5.根据权利要求1所述的一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，haucl4为5mm，kno3为0.5m，巯基苯甲醛为1mm，6-巯基-1-己醇为0.01m。

6.根据权利要求1所述的一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，负压采用-0.4v。

7.一种基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器，其特征在于，是由权利要求1-6任一方法制备而成。

8.一种如权利要求7所述的基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器在制备分析单个肿瘤活细胞内组织蛋白酶b的含量中的应用，其特征在于，所述含量检测的方法包括先建立标准曲线，利用单细胞分析仪，借助显微操作平台将金纳米电极尖端深入肿瘤细胞内，孵育以完成酶切反应；缓慢撤出纳米金电极尖端，彻底清洗后在相同的测试条件下进行dpv测试；将dpv峰电流代入电化学分析标准曲线，分析获知单细胞胞浆内组织蛋白酶b的含量。

9.一种如权利要求7所述的基于多肽-金团簇的纳米电化学传感器在制备分析单个肿瘤活细胞内组织蛋白酶b相对活性中的应用，其特征在于，所述相对活性的检测方法包括将采用组织蛋白酶b抑制剂组处理的dpv峰电流与未用组织蛋白酶b抑制剂处理的峰电流进行对比，获知组织蛋白酶b相对活性。