一种手性医药中间体的酶法合成

1.一种赖氨酸环化脱氨酶，其特征在于，所述赖氨酸环化脱氨酶来源于streptomycespristinaespiralis；所述赖氨酸环化脱氨酶的氨基酸序列为seq id no.1；所述赖氨酸环化脱氨酶的编码基因的核苷酸序列为seq id no.6。

2.一种赖氨酸环化脱氨酶突变体，其特征在于，所述赖氨酸环化脱氨酶突变体为权利要求1所述的赖氨酸环化脱氨酶的突变体；所述赖氨酸环化脱氨酶突变体为相对于野生型赖氨酸环化脱氨酶的氨基酸序列seq id no.1，仅存在第148的位丙氨酸突变、第212位的丙氨酸突变中的一个突变或组合突变。

3.根据权利要求2所述的一种赖氨酸环化脱氨酶突变体，其特征在于，所述赖氨酸环化脱氨酶突变体的氨基酸序列如seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4、seq id no.5所示。

4.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因为编码权利要求3所述的赖氨酸环化脱氨酶突变体的基因，所述编码基因的核苷酸序列如seq id no.7、seq id no.8、seq id no.9、seq id no.10所示。

5.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求1所述赖氨酸环化脱氨酶的编码基因或权利要求4所述的编码基因。

6.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中导入了权利要求5所述的重组载体。

7.一种合成l-哌啶-2-甲酸的方法，其特征在于，以l-赖氨酸为主要底物，以权利要求1中所述赖氨酸环化脱氨酶或权利要求2中所述赖氨酸环化脱氨酶突变体为生物催化剂，在缓冲溶液中进行催化反应，合成l-哌啶-2-甲酸。

8.根据权利要求7所述的合成l-哌啶-2-甲酸的方法，其特征在于，所述赖氨酸环化脱氨酶或突变体的加入形式包括：包含所述赖氨酸环化脱氨酶或突变体的基因工程菌湿菌体、表达所赖氨酸环化脱氨酶及其突变体的细胞破碎液或所述赖氨酸环化脱氨酶及其突变体的基因工程菌湿菌体经细胞破碎、蛋白纯化后分离出的纯酶液。

9.根据权利要求8所述的合成l-哌啶-2-甲酸的方法，其特征在于，催化反应体系中，所述l-赖氨酸的浓度为50～150g/l，菌体浓度为50～150g wcw/l。

10.根据权利要求7所述的合成l-哌啶-2-甲酸的方法，其特征在于，所述催化反应中添加硫酸亚铁作为辅因子、添加triton作为细胞表面活性剂。