一种水霉抑制剂及其制备方法与应用与流程

本发明涉及微生物制剂的，尤其涉及一种水霉抑制剂及其制备方法与应用。

背景技术：

1、在淡水养殖业中，水霉(saprolegnia)作为一种广泛存在的真菌性疾病，长期以来对水生动物的健康构成了严重威胁，特别是在低温季节，其致病性尤为显著。水霉能够感染水生动物的各个生活阶段，且对寄主无严格的选择性，这使得其防控难度大大增加。水霉感染过程中，通过其特有的效应蛋白转运机制，能够抑制宿主的防御反应，导致表皮细胞损伤及组织腐烂，进而引发水产动物游动缓慢、活力减弱乃至死亡，给水产养殖业带来巨大经济损失。

2、草鱼(ctenopharyngodon idella)，作为中国传统的淡水养殖鱼类之一，因其广泛的适应性和经济价值，在国内养殖规模巨大。然而，草鱼同样面临着水霉病的严重挑战，尤其是在环境胁迫和免疫力下降的情况下，极易遭受水霉感染。水霉病的发生不仅影响草鱼的生长性能和品质，还可能导致处于不同生长阶段的个体大量死亡，直接威胁到养殖业的可持续发展。

3、随着环保意识的增强和食品安全标准的提高，传统化学药物如孔雀石绿等因其潜在的毒性和环境残留问题已被逐步禁用或限制使用。这一变化促使研究者们转向更加安全、环保的生物防治方法，以探索替代性的水霉控制策略。近年来，越来越多的研究表明，自然界中存在多种具有水霉拮抗作用的微生物，如粘质沙雷氏菌、气单胞菌、假单胞菌、芽孢杆菌及放线菌等，这些微生物不仅能够有效抑制水霉的生长，还具备无残留、环境友好等优点，显示出巨大的应用潜力。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种水霉抑制剂及其制备方法与应用，用于抑制水霉对水产动物的感染。

2、本发明的目的采用以下技术方案实现：

3、第一方面，本发明提供一种水霉抑制剂，包括：双孢菇多糖和黑附球菌(epicoccumnigrum)z01；

4、黑附球菌z01的保藏号为cctccno：m2024967。

5、进一步的，所述水霉抑制剂中双孢菇多糖的浓度为100-500mg/l，黑附球菌z01的孢子浓度为1.0-8.0×108个/ml。

6、进一步的，所述的水霉抑制剂还包括：

7、副干酪乳杆菌(lacticaseibacillusparacasei)ly02，所述水霉抑制剂中副干酪乳杆菌ly02的浓度为1.0-5.0×109cfu/ml。

8、进一步的，所述的水霉抑制剂还包括：

9、麦角硫因，所述水霉抑制剂中麦角硫因的浓度为300-500μmol/l。

10、第二方面，本发明提供一种水霉抑制剂的制备方法，包括以下步骤：

11、将黑附球菌z01接种于马铃薯葡萄糖肉汤培养基中，并置于175rpm、25℃的摇床中培养5d后，用3层无菌纱布过滤，得到滤液为黑附球菌z01培养液；黑附球菌z01培养液；

12、将双孢菇多糖加入黑附球菌z01培养液，并混合均匀，获得水霉抑制剂。

13、进一步的，所述的水霉抑制剂的制备方法还包括：

14、将副干酪乳杆菌ly02接种于德氏乳杆菌液体培养基中，并置于摇床中培养，用3层无菌纱布过滤，获得副干酪乳杆菌ly02培养液；

15、将副干酪乳杆菌ly02培养液加入黑附球菌z01培养液，并混合均匀，获得水霉抑制剂。

16、进一步的，所述的水霉抑制剂的制备方法还包括：将麦角硫因加入黑附球菌z01培养液，并混合均匀，获得水霉抑制剂。

17、进一步的，所述黑附球菌z01的培养液的od600是1.2-1.5。

18、进一步的，所述副干酪乳杆菌ly02培养液的od600为1.2-1.5。

19、第三方面，本发明还提供一种水霉抑制剂在治疗或预防真菌感染中的应用，所述水霉抑制剂为上述的水霉抑制剂。

20、与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：

21、本发明的水霉抑制剂能够有效抑制真菌的活力和繁殖能力，特别是能够预防由水霉致病菌引起的水霉病。可见，本发明不仅丰富了生防菌的种类，还拓宽了生防菌在水产养殖中水霉病害防控领域的应用。进一步的，本发明不仅为淡水养殖动物水霉病的防治提供了新的解决方法，还有效避免了药残问题。

1.一种水霉抑制剂，其特征在于，包括：双孢菇多糖和黑附球菌(epicoccumnigrum)z01；

2.根据权利要求1所述的水霉抑制剂，其特征在于，所述水霉抑制剂中双孢菇多糖的浓度为100-500mg/l，黑附球菌z01的孢子浓度为1.0-8.0×108个/ml。

3.根据权利要求1所述的水霉抑制剂，其特征在于，还包括：

4.根据权利要求1所述的水霉抑制剂，其特征在于，还包括：

5.一种水霉抑制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的水霉抑制剂的制备方法，其特征在于，还包括：

7.根据权利要求5所述的水霉抑制剂的制备方法，其特征在于，还包括：

8.根据权利要求5所述的水霉抑制剂的制备方法，其特征在于，所述黑附球菌z01的培养液od600是1.2-1.5。

9.根据权利要求6所述的水霉抑制剂的制备方法，其特征在于，所述副干酪乳杆菌ly02培养液的od600为1.2-1.5。

10.一种水霉抑制剂在治疗或预防真菌感染中的应用，所述水霉抑制剂为权利要求1-4任一项所述的水霉抑制剂。